[其他]裂褶菌的培養工藝及其利用

無效

• 申請號: 85103492
• 申請日: 1985-05-22
• 公開（公告）號: CN85103492A
• 公開（公告）日: 1987-04-15
• 發明（設計）人: 李兆蘭
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P13/02;C12P19/04;//;C12R1645);C12R1645);C12R1645)
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本發明屬于擔子菌類的培育及利用技術領域。

在已有技術中，中國科學院微生物研究所用做純種保藏的裂褶菌菌株，其母種培養介質是馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂或麥芽汁瓊脂，最適溫度24°-26℃，尚未應用于工業生產。國外日本“The????Japanese????Journal????Antiobics”Vol.23（2）：157-160頁中報導。裂褶菌培養采用合成培養介質，即用化學成份已知的有機物或無機物配制培養介質，其成本高，菌絲體得率低（培養5天1升發酵液含1-5g菌絲體，多糖得率亦低。（培養5天1升發酵液含0.2-1g多糖）。

本發明的目的是用黃豆粉等做培養介質培養裂褶菌，提高菌絲體及裂褶多糖的得率，并從裂褶菌中提取抗腫瘤、抗放升白及調整機體免疫功能、生產抗菌素增效劑的裂褶多糖和人體必需的氨基酸。

本發明的技術方案是裂褶菌從腐木上經組織分離獲得純菌株南大843，將其接種在PDA或麥芽汁固體斜面培養基上，溫度24℃，生長7-10天，然后轉管純化，放入0°-2℃的冰箱中保存備用。液體發酵培養用天然黃豆粉等配制培養介質，其成份和配比是，100ml培養介質含天然黃豆粉0.5-1，葡萄糖或蔗糖3-4，酵母膏0.2，硫酸鎂0.05，磷酸二氫鉀0.1。培養介質還可用鹽酸硫胺素做添加劑，每100ml培養介質可增加0.001-1mg。250ml搖瓶裝75-150ml培養介質，500ml搖瓶裝150-250ml培養介質，采用往復式搖床，振蕩速度80-130次/分，或旋轉式搖床，振蕩速度100-200轉/分，培養溫度24℃-26℃。在菌絲大量生長時，菌液由深變淺，由混濁逐漸變清。隨著培養時間的延長，發酵液中還原糖、氨態氮、PH都逐漸降低，菌絲體重量不斷增加，至第6天多糖含量最高，還原糖降到1%以下，氨態氮降到15%，PH下降到4.6-4.8，菌球的體積占發酵液總體積70%，此時可終止發酵，發酵周期為五天。

固體發酵培養用70-78%的甘蔗渣（或木屑、山芋渣、棉子殼）、1%的蔗糖或葡萄糖、20-28%的麩皮或米糠、1%的石膏或碳酸鈣，加水拌勻、PH自然、裝入菇瓶，在1.5kg/m²的壓力下消毒1小時，冷卻后，在無菌操作下試管斜面母種接種于菇瓶內，一管母種接種1瓶，培養溫度18-26℃，20-30天菌絲體布滿全瓶即可采收。

裂褶菌在液體發酵培養工藝下生長，每升發酵菌液中含3-5g裂褶多糖（Schizophyllun）（干重），含200-300g菌絲體（濕重）;每100g菌絲體（濕重）含0.8-1g多糖，發酵液和菌絲體中氨基酸含量如下：

氨基酸名稱????100ml發酵液中氨基????100g菌絲體中

酸含量（mg/ml）????氨基酸含量（g）

天門冬氨酸????8.99????2.33

蘇氨酸????3.94????1.22

絲氨酸????2.62????1.29

谷氨酸????11.0????3.82

甘氨酸????2.72????1.13

丙氨酸????2.07????1.65

胱氨酸????1.26????0.238

纈氨酸????4.59????1.37

蛋氨酸????0.22????0.396

異亮氨酸????4.02????2.35

亮氨酸????6.01????1.98

酪氨酸????2.40????0.886

苯氨酸????2.50????1.01

賴氨酸????2.56????1.70

組氨酸????1.19????0.628

精氨酸????2.08????2.08

脯氨酸????2.45????2.45

從上述工藝培養出的裂褶菌提取的裂褶多糖，可用于臨床抗腫瘤、抗放升白、抗炎、降低抗菌素付作用，生產抗菌素增效劑，提高抗菌素效價，提取的氨基酸可用作調味品和兒童食品強化劑。