[發明專利]裂褶菌的培養工藝及其利用

無效

• 申請號: 85103492.6
• 申請日: 1985-05-22
• 公開（公告）號: CN1003454B
• 公開（公告）日: 1989-03-01
• 發明（設計）人: 李兆蘭
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P19/04;//;C12R1645);C12R1645)
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于擔子菌類的培育及利用技術領域。

本發明所述擔子菌類中的一種裂褶菌拉丁文學名SchizophyllumCommuneFr。南大843菌株1985年5月16日保藏于北京中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號CGMCCNO.0012。

在已有技術中，中國科學院微生物研究所用做純種保藏的裂褶菌菌株，其母種培養介質是馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂或麥芽汁瓊脂，最適溫度24°-26℃，尚未應用于工業生產。國外日本“TheJapaneseJournalAntiobics”Vol.23（2）：157-160頁中報導。裂褶菌培養采用合成培養介質，即用化學成份已知的有機物或無機物配制培養介質，其成本高，菌絲體得率低（培養5天1升發酵液含1-5g菌絲體），多糖得率亦低。（培養5天1升發酵液含0.2-1g多糖）。

本發明的目的是用黃豆粉等做培養介質培養裂褶菌，提高菌絲體及裂褶多糖的得率，并從裂褶菌中提取抗腫瘤、抗放升白及調整機體免疫功能、生產抗菌素增效劑的裂褶多糖和人體必需的氨基酸。

本發明的技術方案是裂褶菌從腐木上經組織分離獲得純菌株南大843，將其接種在PDA或麥芽汁固體斜面培養基上，溫度24℃，生長7-10天，然后轉管純化，放入0°-2℃的冰箱中保存備用。液體發酵培養用天然黃豆粉等配制培養介質，其成份和配比是，1000ml培養介質含天然黃豆粉5-10g，葡萄糖或庶糖30-40g，酵母膏2g，硫酸鎂0.5g，磷酸二氫鉀1g。培養介質還可用鹽酸硫胺素做添加劑，每1000ml培養介質可增加0.01-10mg。250ml搖瓶裝75-150ml培養介質，500ml搖瓶裝150-250ml培養介質，采用往復式搖床，振蕩速度80-130次/分，或旋轉式搖床，振蕩速度100-200轉/分，培養溫度24℃-26℃。在菌絲大量生長時，菌液由深變淺，由混濁逐漸變清。隨著培養時間的延長，發酵液中還原糖、氨態氮、pH都逐漸降低，菌絲體重量不斷增加，至第6天多糖含量最高，還原糖降到1%以下，氨態氮降到15%，pH下降到4.6-4.8，菌球的體積占發酵液總體積70%，此時可終止發酵，發酵周期為五天。

固體發酵培養用70-78%（重量）的甘庶渣（或木屑、山芋渣、棉子殼）、1%（重量）的庶糖或葡萄糖、20-28%（重量）的麩皮或米糠、1%（重量）的石膏或碳酸鈣，加水拌勻、pH自然，裝入菇瓶，在1.5kg/m²的壓力下消毒1-2小時，冷卻后，在無菌操作下試管斜面母種接種于菇瓶內，一管母種接種1-3瓶，培養溫度22-26℃，20-30天菌絲體布滿全瓶即可采收。

裂褶菌在液體發酵培養工藝下生長，每升發酵菌液中含3-5g裂褶多糖（Schizophyllan）（干重），含200-300g菌絲體（濕重）;每100g菌絲體（濕重）含0.8-1g多糖，發酵液和菌絲體中氨基酸含量如下：

氨基酸名稱100ml發酵液中100g菌絲體中氨

氨基酸含量基酸含量（g）

（mg/ml）2.33

天門冬氨酸 8.99 1.22

蘇氨酸 3.94 1.29

絲氨酸 2.62 3.82

谷氨酸 11.0 1.13

甘氨酸 2.72 1.65

丙氨酸 2.07 0.238

胱氨酸 1.26 1.37

纈氨酸 4.59 0.396

蛋氨酸 0.22 2.35

異亮氨酸 4.02 1.98

亮氨酸 6.01 0.886

酪氨酸 2.40 1.01

苯氨酸 2.50 1.70

賴氨酸 2.56 0.628

組氨酸 1.19 2.08

精氨酸 2.08 2.45

脯氨酸 2.45

從上述工藝培養出的裂褶菌提取的裂褶多糖，可用于臨床抗腫瘤、抗放升白、抗炎、降低抗菌素付作用，生產抗菌素增效劑，提高抗菌素效價，提取的氨基酸可用作調味品和兒童食品強化劑。