[其他]沉井式垂直凝膠電泳池

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 85102249
• 申請日: 1985-04-01
• 公開（公告）號: CN85102249A
• 公開（公告）日: 1986-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周德明
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院動物研究所
• 主分類號: G01N27/28
• 分類號: G01N27/28
• 代理公司: 中國科學(xué)院專利事務(wù)所
• 代理人: 李悅

本發(fā)明是一種新穎的垂直管型和垂直板型凝膠電泳池。它是一種分析水平的分離工具，主要應(yīng)用于生物學(xué)領(lǐng)域用來分離，鑒定蛋白質(zhì)和核酸大分子物質(zhì)。

垂直凝膠電泳是凝膠電泳的一種主要形式。此種電泳的方法是，首先把制備注好的凝膠管凝膠板垂直地安排在電泳池中，待分離的樣品加到凝膠管的上端或板的樣品槽中，然后接通電源，樣品中的各種成份通過其在凝膠介質(zhì)中的遷移率不同而得以分離。

垂直管型和垂直板型電泳池主要有兩部分組成，電源和電泳池。電泳池分為上、下兩個緩沖液池。一般把同凝膠管或凝膠板上口接觸的緩沖液叫上緩沖液。盛裝上緩沖液的容器稱為上緩沖液池。把上緩沖液池中的電極稱為上電極。反之，則稱為下緩沖液，下緩沖液池，下電極。一般還有池蓋，有的還設(shè)有熱交換器。

六十年代初L.Ornstein和B.J.Davis在聚丙烯酰胺凝膠電泳方面做了開拓性的工作時至今日，傳統(tǒng)的電泳池都是采用同樣的結(jié)構(gòu)方式。即使用上緩液池底板做為凝膠管架，套在凝膠管上的橡膠索環(huán)進一步把上、下緩沖液分開。這樣上、下緩沖液就只能通過凝膠介質(zhì)導(dǎo)電。但是，這種傳統(tǒng)的結(jié)構(gòu)方式存在一些共性的缺點：

1.安插和取下凝膠管時，都要將上緩沖池倒置，倒出池中液體，操作起來很不方便。

2.凝膠管全部插好在上緩沖液底板后，再一起浸到下緩沖液池中。這時就會在一些凝膠管的下口處形成氣泡阻止電流通過凝膠。驅(qū)除這種氣泡十分麻煩。

3.用來固定凝膠管和用來隔斷上、下緩沖液的橡膠索環(huán)多半套在凝膠管的中上部位。一般在這部位樣品比較集中，所以對熱比較敏感，索環(huán)致使該段凝膠散熱不良，這會引起樣品的熱變性而導(dǎo)致生物樣品失活。

4.電泳池中的上、下緩沖液的液位通常處于不同水平，這種液體靜壓力差會在凝膠介質(zhì)中引起潛流，造成一種類似柱層析的效應(yīng)而干擾樣品的電泳行為。有時甚至?xí)沟蜐舛鹊哪z從凝膠管中滑脫出來。

Hoefer公司的美國3，867，271號專利可以說是改變垂直型園管電泳池傳統(tǒng)結(jié)構(gòu)的一種嘗試。它主要強調(diào)對凝膠管的冷卻，結(jié)果在該池中每根凝膠管反而有兩段必須套在橡膠索環(huán)中，結(jié)果使凝膠管有更多的部分得不到冷卻。而且它的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，制造和使用都不方便。因而未見推廣。1981年O.Vesterberg等的美國4248491號專利公布的電泳池結(jié)構(gòu)方式與前述的美國3867271號專利一樣，只不過它以矩形電泳池代替了前者的園形的電泳池。

目前所用的垂直板型凝膠電泳池大部份都是采用園管凝膠電泳池的傳統(tǒng)結(jié)構(gòu)方式。因而，上述園管凝膠電泳池中所存在的各種缺陷在垂直板型凝膠電泳池中往往同樣存在。例如，美國的4290871和美國4292161號專利公布的電泳池都是如此。

本發(fā)明的目的是提供一種新穎的垂直型凝膠電泳池，此電泳池結(jié)構(gòu)簡單，使用方便，而且能克服傳統(tǒng)電泳池中所存在的缺點。

本發(fā)明所提供的沉井式垂直凝膠電泳池包括：一個下緩沖液池，它是一個上段細長，下段粗短，上端敞口，下端封閉的臺階形容器。其上、下兩部分經(jīng)一水平肩板連接成一體。在肩板上分布首一些供安插凝膠管或凝膠板的通孔。凝膠管或凝膠板借助橡膠索環(huán)以它們的下端安插在所說的下緩沖液池的通孔中。橡膠索環(huán)起隔斷上下緩沖液和支持凝膠管或凝膠板的作用。在橡膠索環(huán)的孔的下方有一個向內(nèi)的突沿，它可以控制凝膠管插入的深度。其下電極是可以移動的，且有一個相當(dāng)大的排水體積的頭部。其作用是借助于它放入和取出來調(diào)節(jié)下緩沖液池的液位，使電泳在液體靜壓力平衡環(huán)境中進行。上緩沖液池是一直筒形的容器，它是本電泳池的最大部件。電泳時所說的下緩沖液池連同安插于其上或安放于其中的部件一起沉放于上緩沖液池中。“沉井式”一詞正由此而得名。

本發(fā)明設(shè)有熱交換器，熱交換器或是同上緩沖液池做在一起，做成一個帶水夾套式的容器;或是做成冷卻管分布在上緩沖液池中。這樣，其熱交換器之熱交換面僅僅同上緩沖液接觸、凝膠管或凝膠板的工作區(qū)段完全暴露在上緩沖液池中，其熱量通過上緩沖液傳給熱交換器。這樣就保證了樣品在電泳全過程中不會遇到過熱的環(huán)境。以上種種安排巧妙地克服了傳統(tǒng)式垂直型凝膠電泳池的所有缺點。

用此電泳池電泳的操作程序如下：

第一步，向下緩沖液池加入緩沖液，使其液位達到橡膠索環(huán)的上口，再小心地依次向每個橡膠索環(huán)中插入制備好的凝膠管或板，這樣就不會在其末端形成阻礙電流通過的氣泡。

第二步，把下電極放入下緩沖液池，這時下緩沖液的液面就會上升到超過凝膠管或凝膠板上口的預(yù)定的高度。然后，把下緩沖液池沉放到上緩沖液池中，再向上池加入上緩沖液，其液面控制與下緩沖液池的液面等高，這樣就防止造成液體靜壓力差而干擾樣品的電泳行為。