[發明專利]一種評估三陰乳腺癌復發和預后的生物標志物及其應用

在審

• 申請號: 202310935540.8
• 申請日: 2023-07-28
• 公開（公告）號: CN116660537A
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發明（設計）人: 劉佳妮;張添治
• 申請（專利權）人: 中山大學附屬第五醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/577;G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種評估三陰乳腺癌復發和/或預后的生物標志物，該生物標志物為KLHL22蛋白表達水平。本發明還公開了所述生物標志物在制備評估三陰乳腺癌復發和/或預后的試劑中的用途。本申請首次發現，高風險三陰乳腺癌組織和血液樣本中KLHL22蛋白表達水平顯著高于低風險三陰乳腺癌樣本,檢測KLHL22蛋白表達水平可評估三陰乳腺癌復發,并且KLHL22蛋白表達水平可以作為三陰乳腺癌的獨立預后生物標志物，提示KLHL22蛋白表達水平可作為評估三陰乳腺癌復發和/或預后的分子標志。本發明為三陰乳腺癌的復發和/或預后評估提供了新的特異性分子標志物，臨床應用前景廣闊。

技術領域

本發明屬于腫瘤分子生物學技術領域，具體涉及一種評估三陰乳腺癌復發和預后的生物標志物及其應用。

背景技術

三陰乳腺癌（TNBC）約占所有乳腺癌的?15-20％,是一個預后非常差的類型。三陰乳腺癌的雌激素受體（ER），孕激素受體（PR）和人表皮生長因子受體?2（HER2）均為陰性，且缺乏早期發現的生物標志物和有效的治療靶點，因此一經發現，通常被診斷為組織學等級高的晚期腫瘤，難以從內分泌治療或靶向治療中獲益。此外，三陰乳腺癌患者通常具有高轉移和遠端復發的風險，是預后最差的一種分型，無病生存期（DFS）和總體生存期（OS）相較于其他分型明顯縮短。因此，開發用于評估三陰乳腺癌復發和預后的特異性分子標志物是降低三陰乳腺癌復發轉移、提高病人生存率，降低死亡率的關鍵。

發明內容

基于此，本發明的目的在于克服上述現有技術的不足之處而提供一種評估三陰乳腺癌復發和/或預后的生物標志物，可用于預測三陰乳腺癌復發及預后評估。

為實現上述目的，本發明提供了KLHL22蛋白表達水平作為生物標志物在篩選用于評估三陰乳腺癌復發和/或預后的試劑中的用途。

本發明還提供了KLHL22蛋白表達水平作為生物標志物在制備用于評估三陰乳腺癌復發和/或預后的試劑中的用途。

本發明還提供了檢測KLHL22蛋白表達水平的試劑在制備用于評估三陰乳腺癌復發和/或預后的試劑盒中的用途。

優選地，所述檢測KLHL22蛋白表達水平的試劑包括能與KLHL22蛋白特異性結合的抗體。

本發明所述KLHL22蛋白表達水平是指：通過免疫組化染色細胞質中KLHL22蛋白顯色情況來評估其表達水平。陽性染色細胞呈棕色或黃色。免疫反應性評分采用陽性細胞數和陽性強度評分，評分方法如下:(i)每片取5個視野，以5%的增量從0到100%對陽性腫瘤細胞百分比進行計數，0表示陰性染色。(ii)我們將正強度評分定義為負(0)、弱(1)、中(2)、強(3)四個等級。(iii)從強度和比例(0-300分)中得出總分。然后用ROC曲線確定TNBC中KLHL22表達水平的臨界值。另外，通過酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測血液中KLHL22蛋白表達水平。將保存于-80℃冰箱的全血標本復溶后于1000×g離心20分鐘，取上清進行ELISA檢測。血清樣本中KLHL22蛋白表達水平和樣本顏色深淺呈比例關系。繪制標準樣品曲線后，將讀取的吸光值帶入公式得出樣本濃度。

本申請發明人首次發現，高風險三陰乳腺癌樣本中KLHL22蛋白表達水平顯著高于低風險三陰乳腺癌，檢測KLHL22蛋白表達水平可評估三陰乳腺癌的復發風險，并且KLHL22蛋白高表達水平與較差的臨床分期、較高的復發率顯著相關，另外KLHL22蛋白高表達水平與與較短的平均生存時間、總生存期和無進展生存期顯著相關，KLHL22蛋白表達水平可以作為三陰乳腺癌的臨床分期、復發率以及平均生存時間、總生存期和無進展生存期的獨立預后生物標志物，提示KLHL22蛋白表達水平可作為三陰乳腺癌復發和/或預后的分子標志。

本發明還提供了一種評估TNBC復發和/或預后的試劑盒，所述試劑盒包含檢測KLHL22蛋白表達水平的試劑。

優選地，所述試劑盒還包括能與所述抗體結合的二抗。

優選地，所述二抗標記有辣根過氧化物酶。