[發(fā)明專利]一種海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物、制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310755724.6
• 申請(qǐng)日: 2023-06-26
• 公開（公告）號(hào): CN116536368B
• 公開（公告）日: 2023-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳沛艷;劉新琳;陳偉階;鄭雅莉;郭曉紅;陳志威;鄧小鋒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東迪美新材料科技有限公司;菲詩傾城（廣州）生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P1/04;A61K8/99;A61Q19/08;C12N1/06
• 代理公司: 廣州文智專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 44469
• 代理人: 劉敏

1.一種海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，其特征在于：以海洋芽孢桿菌作為菌種，在含有麩皮提取液的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵，將發(fā)酵后的菌體與發(fā)酵液進(jìn)行共破碎的步驟；

其中，所述海洋芽孢桿菌包括太平洋海洋芽孢桿菌DSM25873、泡菜海洋芽孢桿菌DSM23341或伊赫氏海洋芽孢桿菌THE831中的一種或多種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，其特征在于：包括下述步驟：

S1:采用海洋芽孢桿菌作為菌種，進(jìn)行活化，得種子液；

S2:將S1所述種子液接種在含有麩皮提取液培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵，得到發(fā)酵液產(chǎn)物；

S3:過濾S2所述發(fā)酵液產(chǎn)物，濾除雜質(zhì)，得除雜質(zhì)發(fā)酵液；

S4:高壓共破碎S3所述除雜質(zhì)發(fā)酵液，得發(fā)酵破碎液，離心，得到作為上清液的發(fā)酵破碎液；

S5:超濾S4所述發(fā)酵破碎液，截留分子量小于100KDa的小分子量可溶發(fā)酵液；

S6:向S5所述小分子量可溶發(fā)酵液中加入防腐劑，即得海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，其特征在于：所述含有麩皮提取液的培養(yǎng)基為：8-12g/L蛋白胨、5-10g/L酵母提取物、0.8-1.2g/L磷酸氫二鉀、0.1-0.3g/L七水硫酸鎂，20-30g/L氯化鈉和200-400g/L麩皮提取液，pH為6.5-8.5；

所述麩皮提取液制備方法：取100-200g麩皮與1500-4500g水混合，再添加0.01-0.08g/L中性蛋白酶和0.03-0.06g/Lα-淀粉酶，40-60℃消化2-5小時(shí)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，其特征在于：所述S1步驟中活化，得種子液，其活化培養(yǎng)基為ZMA培養(yǎng)基，成分包括：5g/L胃蛋白胨、1g/L酵母提取物、0.1g/L檸檬酸鐵、19.45g/L氯化鈉、8.8g/L氯化鎂、3.24g/L硫酸鈉、1.8g/L氯化鈣、0.55g/L氯化鉀、0.16g/L碳酸氫鈉、80mg/L溴化鉀、34mg/L氯化鍶、22mg/L硼酸、4mg/L硅酸鈉、1.6mg/L硝酸銨和2.4mg/L氟化鈉，pH為7.6。

5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任意一項(xiàng)所述的一種海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物的制備方法，其特征在于：所述步驟S4中高壓共破碎包括：在工作壓力800-1500bar和破碎溫度2-10℃的條件下使用高壓破碎儀破碎2-3次和/或在工作功率2000-2400W和破碎溫度2-10℃的條件下使用超聲破碎儀對(duì)每10L樣品的破碎時(shí)長120分鐘；

所述步驟S4中離心包括使用碟式離心機(jī)或管式離心機(jī)進(jìn)行離心，分離因素8000-13000G，在OD600_nm下測(cè)定離心后的吸光度，取吸光度值小于或等于0.3作為上清液的可溶發(fā)酵破碎液。

6.一種可通過權(quán)利要求1-5任意一項(xiàng)制備方法所獲得的海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物，其特征在于：所述海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物包括總多糖0.71-0.87mg/mL和總核酸283.3-327.68μg/mL。

8.一種權(quán)利要求6或7所述的海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物在制備抗衰老化妝品中的應(yīng)用。

9.一種抗衰老化妝品，其特征在于：所述抗衰老化妝品包含權(quán)利要求6或7所述的海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的抗衰老化妝品，其特征在于：海洋芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)物添加量為0.5％-20％。