[發明專利]一種調節血糖血脂的小分子牡丹活性肽的制備方法

在審

• 申請號: 202310650329.1
• 申請日: 2023-06-03
• 公開（公告）號: CN116410287A
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發明（設計）人: 張躍忠
• 申請（專利權）人: 山東牡丹愛生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C07K7/08;C07K7/06;C07K9/00;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14;C07K1/107;A61K38/08;A61K38/10;A61K38/14;A61K38/16;A61P3/10;A61P3/06
• 代理公司: 河北圓友緣專利代理事務所(普通合伙) 13173
• 代理人: 呂紀濤

本發明涉及牡丹籽技術領域，具體涉及一種調節血糖血脂的小分子牡丹活性肽的制備方法。利用油用牡丹籽粕作為原料，對其進行去油和去糖處理，再進行多個酶解處理，得到酶解液，并從酶解液中分離了3個不同分子量的小分子牡丹活性肽。體外實驗證實了這些小分子牡丹活性肽具有調節血糖血脂的作用。

技術領域

本發明涉及油用牡丹籽技術領域，具體涉及一種調節血糖血脂的小分子牡丹活性肽的制備方法。

背景技術

籽粕為油用牡丹榨油后的主要副產物，其中膳食纖維含量為?48.7?%，蛋白質含量為20.2?%。高蕾蕾等通過堿溶酸沉法提取牡丹蛋白，經優化后得到最佳提取條件為?3.5?h，pH?9.5，最適溫度?60?oC，料液比?1:10（g/mL），此時提取率最高達到了42.74?%，并且研究了牡丹蛋白的理化性質、功能特性（溶解度、持水性、持油性、乳化性、起泡性和凝膠形成能力）及抗氧化活性，在?DPPH?自由基清除實驗和羥基自由基清除實驗等一系列抗氧化指標實驗中，酶解產物的活性均高于谷胱甘肽，且優于牡丹蛋白。牛亞琪等人優化了從牡丹籽粕中超聲提取芪類化合物和單萜苷類化合物的條件，并與大孔吸附樹脂實驗相結合，創建了一套快捷且實用的提取純化低聚芪類化合物的工藝流程，可用于牡丹油產業副產物的加工利用。

然而，對牡丹籽粕進行回收利用仍然具有十分重要的意義，能夠提供對其資源回收利用率，同時還能為其具有的生物活性發揮更大利用價值提供幫助。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種調節血糖血脂的小分子牡丹活性肽的制備方法。利用該制備方法能夠從牡丹籽粕中回收得到一些調節調節血糖血脂的小分子牡丹活性肽，這些小分子牡丹活性肽具有應用于調節血糖血脂的相關制劑中的應用前景。

本發明目的之一提供一種調節血糖血脂的小分子牡丹活性肽，其選自如SEQ?IDNO.1~3任一所述的肽。

本發明目的之一提供一種調節血糖血脂的小分子牡丹活性糖肽，其選自如SEQ?IDNO.1~3任一所述的肽進行糖基化修飾得到的化合物。

進一步的，所述的小分子牡丹活性糖肽，其包括如SEQ?ID?NO.2或3任一所述的肽進行糖基化修飾得到的化合物或其混合物。

本發明目的之一提供一種所述的小分子牡丹活性肽的制備方法，包括：

得到去油和去糖后的牡丹籽粕；

將所述去油和去糖后的牡丹籽粕進行酶解，從所述酶解液中分離純化得到所述小分子牡丹活性肽。

進一步的，得到去油和去糖后的牡丹籽粕的步驟包括：

將油用牡丹籽粕用粉碎后，過篩，采用水浴回流法去除所述牡丹籽粕中的油脂；

將脫油后的牡丹籽粕干燥后，去除其中的多糖，即可得到所述去油和去糖后的牡丹籽粕。

進一步的，所述水浴回流法包括：將過篩后的牡丹籽粕粉與石油醚以1:10g/mL，50℃反應4h，提取3次；

所述“去除其中的多糖”的步驟包括：將脫油后的牡丹籽粕以1:20g/mL沸水浴回流4h。

進一步的，所述酶解的步驟包括：

將所述去油和去糖的牡丹籽粕用胃蛋白酶和木瓜蛋白酶混合，于pH6.5、50℃酶解4h；迅速轉入100℃水浴中處理10min，使得酶失活，8000rpm離心10min；

上清液繼續加入胰蛋白酶，于pH2.5、37℃酶解4h，迅速轉入100℃水浴中處理10min，使得酶失活，8000rpm離心10min，上清液依次經依次過5kD、3kD和1kD的超濾膜，收集5kD~3kD、3kD~1kD和1kD的3個部分的濾液，適當濃縮，冷凍干燥，即得不同分子量段的小分子牡丹活性肽。

本發明目的之一提供一種所述的小分子牡丹活性糖肽的制備方法，包括：