[發(fā)明專利]脂肪酸修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310631615.3
• 申請日: 2023-05-30
• 公開（公告）號(hào): CN116655770A
• 公開（公告）日: 2023-08-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳勇;羅華;李祥;李紅亮;蔣利敏;紀(jì)登高;皮世玉;羅吉鴻
• 申請（專利權(quán)）人: 樂普健糖藥業(yè)（重慶）有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/52
• 分類號(hào): C07K14/52;C07K1/107;A61K38/19;A61P7/00
• 代理公司: 重慶強(qiáng)大凱創(chuàng)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50217
• 代理人: 陳雍

本發(fā)明涉及多肽藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及脂肪酸修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體及其制備方法和應(yīng)用。使用本方案式(1)所示的脂肪酸修飾劑，修飾氨基酸序列衍生于TPO模擬肽AF12505的血小板生成素模擬肽二聚體，并形成血小板生成素模擬肽四聚體。相對(duì)于現(xiàn)有的TPO模擬肽，本方案的血小板生成素模擬肽二聚體在N端加入了半胱氨酸和賴氨酸，以便于脂肪酸修飾和四聚體的形成。本技術(shù)方案的四聚體可以解決現(xiàn)有技術(shù)中血小板生成素模擬肽的藥效以及體內(nèi)循環(huán)時(shí)間不理想的技術(shù)問題。采用脂肪酸修飾替代Fc、PEG，可以簡化工藝路線和降低免疫原性，本且本方案的同源四聚體可做成口服制劑，可覆蓋的人群范圍更廣，特別適合嬰幼兒群體。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及多肽藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及脂肪酸修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

AF12505是高活性TPO模擬肽，其為14個(gè)氨基酸的短肽，具有促進(jìn)血小板生成的生物活性；對(duì)其進(jìn)行二聚體修飾后，活性顯著提高。2008年8月，美國FDA批準(zhǔn)Amgen公司的羅米司亭(Romiplostim)是第二代受體激動(dòng)劑模擬肽類的代表藥物，是治療免疫性血小板減少癥的新選擇。但是，小分子量多肽蛋白藥物由于分子量較小，分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定的原因，在體內(nèi)容易被降解或被腎臟清除，導(dǎo)致該類藥物在血漿中存留時(shí)間短。優(yōu)化多肽藥物的有效性和長效性等參數(shù)已成為生物制藥的重要研究方向，研究人員嘗試了對(duì)TPO模擬肽及其類似物進(jìn)行化學(xué)修飾和生物修飾，以期提升其作用效果和體內(nèi)循環(huán)時(shí)間。

中國專利CN105017408A公布了一種聚乙二醇化血小板生成素模擬肽同源四聚體，其具有長效升高外周血血小板數(shù)量的功能，但未見其上市，其使用PEG進(jìn)行長效化制備，可能存在一定臨床風(fēng)險(xiǎn)。中國專利CN109384849A公布了一種人血清白蛋白分子與酵母偏好密碼子編碼的促血小板生成素模擬肽融合蛋白，其在人體內(nèi)具有較長的半衰期，但使用人血清白蛋白作為藥物載量，生產(chǎn)制備工藝復(fù)雜，且制備藥物不穩(wěn)定，存在降解風(fēng)險(xiǎn)，此外藥物活力低，只有羅米司亭的1/10不到，成藥性差。因此，尋找到一種適合的TPO模擬肽及其類似物的化學(xué)修飾或者生物修飾的方法，對(duì)提升藥物作用效果和循環(huán)時(shí)間非常關(guān)鍵。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明意在提供脂肪酸修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體，以解決現(xiàn)有技術(shù)中血小板生成素模擬肽的藥效以及體內(nèi)循環(huán)時(shí)間不理想的技術(shù)問題。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

脂肪酸修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體，其包括兩個(gè)血小板生成素模擬肽二聚體；血小板生成素模擬肽二聚體修飾有脂肪酸修飾劑，所述脂肪酸修飾劑的結(jié)構(gòu)式如式(1)所示：

其中，a為4-22的整數(shù)，b為1-2的整數(shù)，c為1-10的整數(shù)；R₁為羧基、甲基和1H-四氮唑-5-基中的一種；R₂為離去基團(tuán)。

本技術(shù)方案還提供了脂肪酸修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體的制備方法，其特征在于，包括以下依次進(jìn)行的步驟：

S1獲取血小板生成素模擬肽二聚體；

S2脂肪酸修飾劑和血小板生成素模擬肽二聚體反應(yīng)生成脂肪酸修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體。

本技術(shù)方案還提供了一種脂肪酸修飾劑在修飾血小板生成素模擬肽同源四聚體中的應(yīng)用，其特征在于，所述脂肪酸修飾劑的結(jié)構(gòu)式如式(1)所示：：

其中，a為4-22的整數(shù)，b為1-2的整數(shù)，c為1-10的整數(shù)；R₁為羧基、甲基和1H-四氮唑-5-基中的一種；R₂為離去基團(tuán)。

進(jìn)一步，血小板生成素模擬肽二聚體的序列如下：