[發(fā)明專利]篩選具有改善肌少癥作用的植物提取物的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202310567564.2
• 申請日: 2023-05-19
• 公開（公告）號: CN116334168A
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史仍飛;李濤;王茹;田向陽;于芳芳;李婷婷
• 申請（專利權(quán)）人: 上海體育學(xué)院
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;G01N33/68
• 代理公司: 北京卓恒知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11394
• 代理人: 孔鵬

1.一種篩選具有改善肌少癥作用的植物提取物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

將植物提取物灌喂實(shí)驗(yàn)動物后進(jìn)行采血得到樣品血樣，對所述樣品血樣分離血清得到樣品血清；將等量生理鹽水灌喂實(shí)驗(yàn)動物后進(jìn)行采血得到對照血樣，對所述對照血樣分離血清得到對照血清；

將C₂C₁₂成肌細(xì)胞采用生長培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)后進(jìn)行誘導(dǎo)分化成肌管狀態(tài)；

采用D-半乳糖對所述肌管狀態(tài)的所述C₂C₁₂成肌細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)得到衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞；

將含有所述樣品血清的第一培養(yǎng)基與含有所述對照血清的第二培養(yǎng)基分別進(jìn)行干預(yù)所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞，通過對比干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的指標(biāo)篩選出具有改善肌少癥作用的植物提取物；所述指標(biāo)包括細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞線粒體呼吸功能水平、蛋白合成率和蛋白質(zhì)合成信號表達(dá)情況中的至少一種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的篩選具有改善肌少癥作用的植物提取物的方法，其特征在于，所述細(xì)胞形態(tài)指標(biāo)包括細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞體積；經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞體積大于經(jīng)所述第二培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞體積，則判定所述植物提取物具有改善肌少癥作用；

可選地，經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目與經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)目相差≥20％，經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的細(xì)胞體積與經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的細(xì)胞體積相差≥5％，則判定所述植物提取物具有改善肌少癥作用。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的篩選具有改善肌少癥作用的植物提取物的方法，其特征在于，經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的線粒體呼吸功能水平比經(jīng)所述第二培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的線粒體呼吸功能水平高，則判定所述植物提取物具有改善肌少癥作用；

可選地，經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的線粒體呼吸功能水平與經(jīng)所述第二培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的線粒體呼吸功能水平相差≥20％，則判定所述植物提取物具有改善肌少癥作用。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的篩選具有改善肌少癥作用的植物提取物的方法，其特征在于，經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的蛋白合成率比經(jīng)所述第二培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的蛋白合成率高，則判定所述植物提取物具有改善肌少癥作用；

可選地，經(jīng)所述第一培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的蛋白合成率與經(jīng)所述第二培養(yǎng)基干預(yù)后的所述衰老的C₂C₁₂成肌細(xì)胞的蛋白合成率相差≥20％，則判定所述植物提取物具有改善肌少癥作用。