[發明專利]抗菌肽、表達載體及其應用

在審

• 申請號: 202310550181.4
• 申請日: 2022-04-29
• 公開（公告）號: CN116410292A
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發明（設計）人: 胡霞;余璐;初旭;李國強;楊梅嬌;蔣迪;王澤光;張飛萍;吳松青;王榮
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;C12N15/81;A01N37/46;A01N47/44;A01P5/00;A61K38/17;A61P31/04;C12R1/84
• 代理公司: 廈門原創專利事務所(普通合伙) 35101
• 代理人: 吳廷正

本發明公開了抗菌肽、表達載體及其應用，本發明方案針對目前松墨天牛抗菌肽基因家族不完整的問題，提出了四種松墨天牛抗菌肽MaltCec、MaltDef、MaltAtt?1、MaltAtt?2及其對應的抗菌肽基因和對應的外源表達載體及產物，同時，還揭示了對應誘導表達和純化方法，本方案豐富了松墨天牛抗菌肽基因家族,實現了松墨天牛抗菌肽基因MaltCec、MaltDef、MaltAtt?1、MaltAtt?2的外源表達；本發明方案還成功的利用畢赤酵母將松墨天牛抗菌肽MaltCec、MaltDef、MaltAtt?1、MaltAtt?2基因表達，同時證明其具有抑菌活性，本方案的松墨天牛抗菌肽抑菌效果佳、其制備可靠穩定且具有積極應用前景。

分案申請聲明

本申請為2022年04月29日遞交的申請號為202210468553.4發明名稱為“松墨天牛抗菌肽及其編碼基因和應用”的中國發明專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及生物基因工程技術領域，尤其涉及抗菌肽、表達載體及其應用。

背景技術

抗菌肽是宿主非特異性免疫防御系統產生的一類對抗外源性病原體的肽類活性物質，是天然免疫的效應分子。近些年來,隨著傳統抗生素的大量使用,耐藥細菌的出現,為人類的健康帶來了巨大的隱患。抗菌肽具有廣譜抗細菌、真菌、病毒、寄生蟲的活性,且不易產生耐藥菌株的優點。目前作為抗生素的替代品或者與抗生素協同作用有望成為新的抗菌藥物,具有廣闊的應用價值和開發前景。

重組蛋白表達技術能夠高效大量獲得目的蛋白,與其他真核及原核表達系統相比,畢赤酵母表達系統具有易于操作,多種轉錄后修飾(如多肽折疊,酰化,糖基化,甲基化等),遺傳系統穩定及蛋白可高水平表達等優點。

在現有技術中：尹娜等在畢赤酵母中表達了抗菌肽Cecropin?D(尹娜,中國生物制品學雜志,2008)；王珍等在畢赤酵母中表達了抗菌肽Cecropin?AD(王珍等,中國畜牧雜志,2010；金豐良等在畢赤酵母中克隆表達了家蠅防御素Defensin(金豐良,中山大學學報,2006)；吳松泉等在畢赤酵母中表達了致倦庫蚊防御素Defensin(吳松泉,免疫學雜志,2013)；然而，松墨天牛抗菌肽基因家族不完整，其相應的研究也較少，因此，針對松墨天牛進行研究，豐富其抗菌肽基因家族是非常具有現實意義的研究課題。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提出一種抑菌效果佳、制備可靠穩定且具有積極應用前景的抗菌肽、表達載體及其應用。

為了實現上述的技術目的，本發明所采用的技術方案為：

一種松墨天牛抗菌肽，所述松墨天牛抗菌肽為松墨天牛抗菌肽MaltCec、松墨天牛抗菌肽MaltDef、松墨天牛抗菌肽MaltAtt-1或松墨天牛抗菌肽MaltAtt-2；

其中，

松墨天牛抗菌肽MaltCec的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，

松墨天牛抗菌肽MaltDef的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，

松墨天牛抗菌肽MaltAtt-1的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.3所示，

松墨天牛抗菌肽MaltAtt-2的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.4所示。

基于上述，本發明還提供編碼上述所述松墨天牛抗菌肽的基因，其中，

編碼松墨天牛抗菌肽MaltCec的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.5所示，

編碼松墨天牛抗菌肽MaltDef的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.6所示，

編碼松墨天牛抗菌肽MaltAtt-1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.7所示，