[發明專利]一種梅菜提取物及其提取方法和應用

在審

• 申請號: 202310521256.6
• 申請日: 2023-05-09
• 公開（公告）號: CN116548475A
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發明（設計）人: 王琴;段鄧樂;楊文華;黃晟;馮志強;張阮冰
• 申請（專利權）人: 仲愷農業工程學院
• 主分類號: A01N65/08
• 分類號: A01N65/08;A01P21/00;A01P3/00
• 代理公司: 廣州匯航專利代理事務所(普通合伙) 44537
• 代理人: 黃健儀

1.一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：將晾曬好的梅菜干剪碎，用蒸餾水沖洗兩遍，用3％抗壞血酸溶液浸洗15～60s，將梅菜干暴露于45℃～60℃醋酸蒸氣中蒸熏5～60min；

步驟2：將熏蒸好的梅菜干置于-120℃～-196℃低溫環境中冷凍18～24h，取出后低溫研磨成梅菜粉末，將梅菜粉末浸漬于抗壞血酸-乙酸溶液，在300MHz～300kMHz的微波環境中攪拌1～5h；

步驟3：加入無水氯化鈣和與抗壞血酸-乙酸溶液等體積的二氯甲烷，用超聲波輔助提取1～3h后，布氏漏斗抽濾，用二氯甲烷洗滌濾渣，得到提取液；

步驟4：將提取液置于真空減壓濃縮器首次濃縮，回收二氯甲烷后，提升濃縮溫度進行二次濃縮，得到提取物浸膏后用氮氣風干，得到初提物；

步驟5：用15mL甲醇活化C₁₈柱，再用無離子水平衡，初提物用石油醚：乙酸乙酯(V：V＝9.1：0.9)充分溶解，分3次洗滌倒入上樣，淋洗液棄去，再用石油醚：乙酸乙酯(V：V＝2：8)洗脫，收集洗脫液并濃縮至干，再用95％乙醇醇沉5～10h，布氏漏斗抽濾后，得到提取物乙醇溶液；

步驟6：將得到的提取物乙醇溶液用孔徑為0.45μm的微孔濾膜過濾，將過濾得到的濾液進行柱層析，以0.1mol/L?NaCl洗脫，收集洗脫峰區域的洗脫液，濃縮后進行透析去鹽并冷凍干燥，得到梅菜提取物。

2.根據權利要求1所述的一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，步驟1中的所述梅菜采用以下步驟制備：

步驟A：將清洗好的雪里蕻置于40℃～60℃的3％抗壞血酸水溶液中焯水5～10s，取出后在晾0.5～2h，重復該步驟三次；

步驟B：將焯水好的雪里蕻置于蒸籠中水蒸氣蒸煮3～15min，再轉移至密閉的容器內發酵4～8h，將發酵好的雪里蕻置于陽光下晾曬1～5天；

步驟C：將步驟B得到的雪里蕻置于蒸籠中水蒸氣蒸煮50～80min，再將雪里蕻置于陽光下晾曬1～2天，重復該步驟三次。

3.根據權利要求1所述的一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，步驟2中抗壞血酸-乙酸溶液由10g抗壞血酸溶解于100mL去離子水中，然后加入100mgEDTA和30mL冰乙酸搖勻制成。

4.根據權利要求1所述的一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，在所述步驟2中，梅菜粉末與抗壞血酸-乙酸溶液的體積比為1:10～50。

5.根據權利要求1所述的一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，在所述步驟3中，無水氯化鈣與二氯甲烷的體積比為1:2～3。

6.根據權利要求1所述的一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，在所述步驟4中，首次濃縮的溫度為39℃，濃縮壓力為45～50kPa；二次濃縮的溫度為95～100℃，濃縮壓力為0.05～0.075Mpa。

7.根據權利要求1所述的一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，在所述步驟5中，醇沉的醇沉濃度為60％～80％，醇沉溫度為2～6℃。

8.根據權利要求1所述的一種梅菜提取物的提取方法，其特征在于，在所述步驟6中，所述透析用透析袋的截留分子量為3500Da。

9.一種梅菜提取物，其特征在于，采用權利要求1-8任一項所述的梅菜提取物的提取方法得到。

10.根據權利要求9所述的梅菜提取物在如下任一種的應用：

(1)調節植物生長速率；

(2)制備用于調節植物生長速率的制劑；

(3)抑制植物病原微生物；

(4)制備用于抑制植物病原微生物制劑。