[發(fā)明專利]一種利用廢棄玉米漿發(fā)酵生產(chǎn)靈菌紅素的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310519215.3
• 申請(qǐng)日: 2023-05-10
• 公開（公告）號(hào): CN116555369A
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱天擇;季立豪
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 芝諾（蘇州）生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12P17/16
• 分類號(hào): C12P17/16;C12N1/20;C12R1/43
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種靈菌紅素發(fā)酵生產(chǎn)方法，應(yīng)用發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵粘質(zhì)沙雷氏菌以生產(chǎn)靈菌紅素，其特征在于：

所述發(fā)酵培養(yǎng)基包含：氮源、花生餅粉2.5～4?g/L、CaCl2?2.5～4.0?g/L、氯化鈉?5.0g/L、蔗糖5～7.5?g/L、甘氨酸0.5～1?g/L，脯氨酸0.5～1?g/L，消泡劑1?mL/L；所述氮源由玉米漿干粉和胰蛋白胨組成，二者的比例為16:4～8:12；

所述粘質(zhì)沙雷氏菌為Serratia?marcescens?PG-Zeno-001菌株，已于2023年3月27日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC?NO：M?2023361。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靈菌紅素發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于：所述玉米漿干粉和胰蛋白胨的濃度總和在16～24?g/L的范圍。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靈菌紅素發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于：所述玉米漿干粉的濃度為8～16?g/L，所述胰蛋白胨的濃度為4～12?g/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的靈菌紅素發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）發(fā)酵菌株的選擇：菌株為粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia?marcescens)PG-Zeno-001：

（2）發(fā)酵培養(yǎng)基配制：玉米漿干粉16?g/L，胰蛋白胨4?g/L、花生餅粉2.5～4?g/L、CaCl22.5～4.0?g/L、氯化鈉?5.0?g/L、蔗糖5～7.5?g/L、甘氨酸0.5～1?g/L，脯氨酸0.5～1?g/L，消泡劑1?mL/L，使用鹽酸將培養(yǎng)基pH?調(diào)至?6.0；121℃濕熱滅菌20分鐘后備用；

（3）補(bǔ)料培養(yǎng)基配制：玉米漿干粉?300?g/L、花生餅粉50?g/L、蔗糖300?g/L、脯氨酸10g/L，不調(diào)pH，121℃濕熱滅菌20分鐘后備用；

（4）斜面制備：將上述發(fā)酵菌株甘油管接種LB斜面進(jìn)行活化培養(yǎng)，25～30℃恒溫培養(yǎng)24～48?h，制得斜面，斜面冷藏待用；

（5）搖瓶種子培養(yǎng)：將步驟（4）得到的斜面菌株接種于以滅菌的裝有搖瓶LB種子培養(yǎng)基的搖瓶中，200?rpm，在25～30℃培養(yǎng)8?h左右：

（6）一級(jí)種子培養(yǎng)：將步驟（5）培養(yǎng)好的搖瓶種子按?1%體積比接種于已滅菌的裝有5?L的LB培養(yǎng)基的10?L一級(jí)種子罐，開始培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：通氣量?0.3～1.5?VVM，罐壓0.1?Mpa，溫度25～30°C，溶解氧?1%～80%飽和度，培養(yǎng)時(shí)間?10?h；

（7）發(fā)酵罐發(fā)酵：將步驟（6）培養(yǎng)好的一級(jí)種子按?5%～10%體積比接種于已滅菌的裝有50?L發(fā)酵培養(yǎng)基的100?L發(fā)酵罐，開始培養(yǎng)；培養(yǎng)條件：初始通氣量?0.3?VVM，罐壓0.1?Mpa，溫度25～30°C，培養(yǎng)時(shí)間?48～96小時(shí)；溶氧控制方案為：0-12?h初始轉(zhuǎn)速為200?rpm，隨著溶氧的降低緩慢提高轉(zhuǎn)速至350?rpm，隨后通過攪拌與溶氧關(guān)聯(lián)控制溶解氧30%；12～36?h通過溶氧與補(bǔ)料關(guān)聯(lián)控制溶解氧15%，36?h～發(fā)酵最后降低攪拌轉(zhuǎn)速至200?rpm，通過溶氧與補(bǔ)料關(guān)聯(lián)控制溶解氧10%。