[發明專利]一種α9α10 nAChR突變體及其應用

在審

• 申請號: 202310503582.4
• 申請日: 2023-05-06
• 公開（公告）號: CN116333093A
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 羅素蘭;江秀;朱曉鵬;長孫東亭
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C07K14/705
• 分類號: C07K14/705;C12N15/12;A61K38/17;A61P27/16;A61P35/00;A61P29/00;A61P25/04;A61P17/00
• 代理公司: 南寧市科典知識產權代理事務所(普通合伙) 45135
• 代理人: 謝正星

本發明屬于分子生物學領域，具體為一種α9α10nAChR突變體及其應用。所述突變體是由野生型α9nAChR的氨基酸序列突變而來，所述突變為所述α9nAChR的氨基酸序列第224位的酪氨酸定點突變為丙氨酸；所述野生型α9nAChR的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。本發明的α9α10nAChR突變體顯著降低了本體α9α10nAChR對ACh的敏感性，可用于制備治療由α9α10nAChR引起的內耳疾病、慢性疼痛、癌癥、尋常型天皰瘡和炎癥性疾病藥物。

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，具體涉及一種α9α10?nAChR突變體及其應用。

背景技術

乙酰膽堿受體(AChRs)是自然界普遍存在的一種具有重要生理功能的膜蛋白，能調節生物體一系列的生理功能，如：痛覺、認知、記憶、焦慮等。按照對配體敏感性的不同，AChRs分為毒蕈型乙酰膽堿受體(mAChRs)和煙堿型乙酰膽堿受體(nAChRs)兩大類。

煙堿型乙酰膽堿受體(nAChRs)廣泛分布于肌肉、中樞神經系統和外周神經系統中，與各種疾病的發生密切相關。其中，α9α10亞型是近年來發現的新型乙酰膽堿受體家族成員之一，也是全世界生物醫學研究者關注的熱點之一。研究顯示α9α10?nAChR亞型與人類病理生理狀態如慢性疼痛(神經痛)和癌癥發展等有關。α9α10?nAChR作為配體門控離子通道，會被ACh激活，α9α10?nAChR功能的激活與抑制是引起上述疾病的重要因素，因此開發出靶向α9α10?nAChR的藥物就顯得極具價值。

發明內容

本發明旨在提供一種α9α10?nAChR的突變體及其應用，所述α9α10?nAChR突變體與本體α9α10?nAChR相比，顯著降低了α9α10?nAChR對ACh的敏感性，可用于制備治療由α9α10nAChR引起的內耳疾病、慢性疼痛、癌癥、尋常型天皰瘡和炎癥性疾病藥物。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種α9α10?nAChR突變體，所述突變體是由野生型α9?nAChR的氨基酸序列突變而來，所述突變為所述α9?nAChR的氨基酸序列第224位的酪氨酸定點突變為丙氨酸；所述野生型α9?nAChR的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

進一步地，所述α9α10?nAChR突變體的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

本發明提供了編碼上述突變體的基因。

優選地，所述突變體的編碼基因序列如SEQ?ID?No.4所示。

本發明提供了上述α9α10?nAChR突變體在制備治療由α9α10?nAChR引起的疾病的藥物中的用途。

具體地，所述疾病包括內耳疾病、慢性疼痛、癌癥、尋常型天皰瘡和炎癥性。

本發明的有益效果：

本發明公開的α9α10?nAChR突變體，由野生型α9?nAChR的氨基酸序列(SEQ?IDNO.1)突變而來，所述野生型α9?nAChR的氨基酸序列第224位的酪氨酸定點突變為丙氨酸。實驗結果表明：所述突變體與本體α9α10?nAChR相比，顯著降低了α9α10?nAChR對ACh的敏感性，可用于制備治療由α9α10?nAChR引起的內耳疾病、慢性疼痛、癌癥、尋常型天皰瘡和炎癥性疾病藥物。

附圖說明

圖1是本發明α9α10?nAChR突變體對應PCR產物電泳圖；

圖2是本發明α9α10?nAChR突變體目的基因測序圖；

圖3是本發明α9α10?nAChR突變體對應質粒，酶切產物和cRNA電泳圖；

圖4是本發明α9α10?nAChR突變體模型成功構建的電流圖；