[發明專利]一種米卡芬凈中間體FR901379高產菌株及其應用

在審

• 申請號: 202310455004.8
• 申請日: 2023-04-23
• 公開（公告）號: CN116496911A
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發明（設計）人: 蔣興;韓雙;許江麗;陳仁清;陳峰;陳志文
• 申請（專利權）人: 浙江昊清生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P21/02;C07K7/56;C12R1/645
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 楊佩佩

本發明提供一種菌株HQ?MK?011，拉丁學名為Colephoma?empetri，保藏編號為CGMCC?No.40516，于2023年03月06日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。本發明菌株HQ?MK?011為誘變得到的高產菌株，發酵單位較高，且能穩定生產FR901379。通過本發明菌株HQ?MK?011得到的發酵液粘度明顯減少，有利于溶氧的傳遞，使得發酵罐得到相同產量的周期明顯縮短，相同周期的發酵單位明顯提高，最高可達約4g/L。通過本發明菌株的得到的發酵液的雜質比例下降，使下游提取工藝成本減少，有利于工業化生產。

技術領域

本發明屬于微生物發酵領域，具體涉及一種產米卡芬凈中間體FR901379的高產菌株及其制備方法和應用。

背景技術

FR901379是合成米卡芬凈類藥的重要前體物質，通過脫酰化作用后得到米卡芬凈母核FR179642，米卡母核化學合成得到的新型棘白菌素類抗真菌藥物米卡芬凈；它對念珠菌如白念珠菌、光滑念珠菌、熱代念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌有較好的抑制活性，對于曲霉也有良好的體外抑制活性，但對于新生隱球菌、鐮刀菌、接合菌和白吉利毛孢子菌等無抑制活性。

米卡芬凈(Micafungin)商品名為Fungusrd，可以用于治療食道念珠菌感染、骨髓移植及ADS患者中性粒細胞減少癥的預防治療。

FR901379可以通過發酵菌株進行生產。

中國專利CN202210496769.1中公開了一株高產FR901379的菌株，所述菌株為巖高蘭鞘莖點霉(Coleophoma?empetri)H40-23，所述菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏編號為CGMCC?No.40075，保藏日期為2022年1月29日，該發明還提供了上述菌株在生產FR901379中的應用。該菌株FR901379產量為587.8mg/L，比對照菌株(365.2mg/L)高222mg/L，比誘變前提高了60.8％。但其產量對于實際生產仍有較大的提升空間。

中國專利CN201810536315.6中公開了一種FR179642的制備方法，該方法包括：1)發酵FR901379的培養基的制備；2)將菌株Coleophoma?empetri種子培養液接種于發酵培養基進行發酵；3)在發酵培養24-72h后，向發酵液中補加棕櫚酸甲酯和二甲基硅油混合物；4)當發酵160h后，FR901379的濃度不再增長時，發酵結束；5)將上一步得到的FR901379與脫酰酶交聯酶聚體反應，轉化為FR179642。其方法中FR901379放罐濃度為3.40g/L。雖然FR901379產量有所提升，但其適用的培養基粘度會偏高，不利于溶氧傳遞。此外，該專利中的菌株發酵通過補加棕櫚酸甲酯和二甲基硅油來提高FR901379的產素水平，使發酵成本增加且工藝更加復雜化。因此，獲得更優良的種質資源對于FR901379的生產十分必要。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了提供了一種菌株HQ-MK-011，通過對其進行發酵，可以大量生產FR901379，能夠為米卡芬凈類藥的生產提供大量原料，解決臨床需求問題。

一方面，本發明提供了一種菌株HQ-MK-011。

所述的菌株HQ-MK-011的拉丁學名為Coleophoma?empetri，保藏編號為CGMCCNo.40516，于2023年03月06日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。

所述的菌株HQ-MK-011的菌落顏色為灰黑色，表面有凹痕。

另一方面，本發明提供了前述的菌株HQ-MK-011在制備FR901379中的應用。

再一方面，本發明提供了一種生產FR901379的方法。

所述的方法中包括將權利要求1所述的菌株HQ-MK-011接種于培養基后進行發酵。