[發明專利]一種前列腺癌類器官的培養基體系及培養方法

在審

• 申請號: 202310440420.0
• 申請日: 2023-04-23
• 公開（公告）號: CN116496977A
• 公開（公告）日: 2023-07-28
• 發明（設計）人: 游明亮;蔡超杰;邢華楊
• 申請（專利權）人: 杭州艾名醫學科技有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/09
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 厲洋洋

1.一種前列腺癌類器官的培養基體系，其特征在于，所述培養基體系包括成球培養基和分化培養基；

所述成球培養基包括Advanced?DMEM/F12基礎培養基、B27、L-谷氨酰胺、R-Spondin-1重組蛋白、Noggin蛋白、FGF?basic、FGF-10、EGF、ROCK抑制劑Y-27632、A83-01、p38MAPK抑制劑SB202190、煙酰胺、肝細胞生長因子、Wnt?3a細胞因子、硫酸酯酶2重組蛋白；

所述分化培養基包括所述成球培養基和分化培養添加劑；所述分化培養基添加劑包括氯化鋅和亞精胺。

2.根據權利要求1所述一種前列腺癌類器官的培養基體系，其特征在于，所述成球培養基還包括雙氫睪酮和PGE2。

3.根據權利要求2所述一種前列腺癌類器官的培養基體系，其特征在于，所述成球培養基還包括pH緩沖液、抗菌劑和抗氧化劑；所述pH緩沖液為HEPES，所述抗菌劑為Primocin抗生素，所述氧化劑為N-乙酰半胱氨酸。

4.根據權利要求3所述一種前列腺癌類器官的培養基體系，其特征在于，所述成球培養基中，HEPES的濃度為5-10mM、B27的濃度為1×、L-谷氨酰胺的濃度為1×、R-Spondin-1重組蛋白的濃度為100-200ng/ml、Noggin蛋白的濃度為50-100ng/ml、FGF?basic的濃度為1-2ng/ml、FGF-10的濃度為10-20ng/ml、EGF的濃度為50-100ng/ml、ROCK抑制劑Y-27632的濃度為10-20μM、A83-01的濃度為0.5-2μM、雙氫睪酮的濃度為1-2nM、Primocin抗生素的濃度為50-100μg/ml、p38MAPK抑制劑SB202190的濃度為10-20μM、煙酰胺的濃度為10-20mM、N-乙酰半胱氨酸的濃度為1-2mM、PGE2的濃度為1-2μM、Wnt?3a細胞因子的濃度為10-20ng/ml、肝細胞生長因子的濃度為50-100ng/ml、硫酸酯酶2重組蛋白的濃度為5-10ng/ml；溶劑為Advanced?DMEM/F12基礎培養基。

5.根據權利要求4所述一種前列腺癌類器官的培養基體系，其特征在于，HEPES的濃度為10mM、R-Spondin-1重組蛋白的濃度為125ng/ml、Noggin蛋白的濃度為100ng/ml、FGFbasic的濃度為1ng/ml、FGF-10的濃度為20ng/ml、EGF的濃度為50ng/ml、ROCK抑制劑Y-27632的濃度為10μM、A83-01的濃度為0.5μM、雙氫睪酮的濃度為1nM、Primocin抗生素為100μg/ml、p38MAPK抑制劑SB202190的濃度為10μM、煙酰胺的濃度為10mM、N-乙酰半胱氨酸的濃度為1.25mM、PGE2的濃度為1μM、Wnt?3a細胞因子的濃度為10ng/ml、肝細胞生長因子的濃度為50ng/ml、硫酸酯酶2重組蛋白的濃度為5ng/ml；溶劑為Advanced?DMEM/F12基礎培養基。

6.根據權利要求4所述一種前列腺癌類器官的培養基體系，其特征在于，所述分化培養基中，氯化鋅的濃度為10-20mg/L，亞精胺的濃度為5-10mM。

7.根據權利要求4所述一種前列腺癌類器官的培養基體系，其特征在于，所述分化培養基中，氯化鋅的濃度為10mg/L，亞精胺的濃度為5mM。

8.一種前列腺癌類器官的培養方法，其特征在于，采用如權利要求1～7任意一項所述的培養基體系進行培養；其中，先在所述成球培養基中對病灶組織樣本進行培養，再向培養液中添加所述分化培養基繼續培養。