[發(fā)明專利]一種基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202310437933.6 | 申請日： | 2023-04-23 |
| 公開（公告）號： | CN116525007A | 公開（公告）日： | 2023-08-01 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 盧學(xué)強(qiáng);龐小可;付文靜;韓承龍 | 申請（專利權(quán)）人： | 南開大學(xué) |
| 主分類號： | G16B30/00 | 分類號： | G16B30/00;G01N33/483;G01N27/62;G01N21/33;G16B40/00;G06F18/24;G06F18/23 |
| 代理公司： | 天津諾德知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 12213 | 代理人： | 王旭 |
| 地址： | 300350*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基于 穩(wěn)定 同位素 dna 條形碼 技術(shù) 海洋 食物 結(jié)構(gòu) 解析 方法 | ||
1.一種基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：采集海洋生物樣本，測定樣品中的δ15N值確定消費(fèi)者的營養(yǎng)級，使用DNA宏條形碼技術(shù)分析胃含物確定消費(fèi)者的食性；以營養(yǎng)級為縱坐標(biāo)，以捕食關(guān)系為物種間連線依據(jù)繪制海洋食物網(wǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：具體步驟如下：
步驟一：采集海洋區(qū)域內(nèi)消費(fèi)者樣本并分別處理制成樣品；
步驟二：測定所得樣品穩(wěn)定同位素；
采用DNA宏條形碼技術(shù)對消費(fèi)者樣本胃含物進(jìn)行分析；
步驟三：分析消費(fèi)者樣本的營養(yǎng)級及食物種類；
步驟四：解析海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：對海洋區(qū)域內(nèi)的游泳生物進(jìn)行樣本采集，取肌肉烘干、研磨制成樣品；
海洋區(qū)域內(nèi)的游泳生物包括魚類、蝦類、蟹類、頭足類、螺類和貝類中的一種或多種；魚類取第一背鰭附近肌肉，蝦類取其腹部肌肉，蟹類取其第一鰲足肌肉，頭足類取其腕部肌肉，螺類去殼取肌肉，貝類取閉殼肌。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：通過同位素比率質(zhì)譜儀測定并計算樣品中δ15N值；元素分析儀氦氣吹掃流量為200mL·min-1；氧化爐/還原爐溫度為1000℃，進(jìn)入質(zhì)譜儀載氣氦氣流量為150mL·min-1。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：使用如下公式計算海洋生物營養(yǎng)級：
TL＝(δ15NSC－δ15Nblv)/TEF+λ
式中：λ表示基準(zhǔn)生物的營養(yǎng)級；TEF表示一個營養(yǎng)級的氮富集度；δ15Nblv表示基準(zhǔn)生物的δ15N比值；δ15NSC為所測海洋生物的δ15N比值。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：λ為2；TEF為2.5‰；δ15Nblv為7.7‰。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：采集消費(fèi)者樣本胃含物，提取DNA，通過微量紫外分光光度計檢測含量及純度，選取A260/280在1.7～2.0之間的DNA用作分析樣品；對胃含物的COI區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增，高通量測序后對有效序列進(jìn)行OTU聚類和物種分類分析，通過物種比對得知食物種類。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：根據(jù)物種營養(yǎng)級計算結(jié)果及食性分析結(jié)果繪制食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)圖。
9.根據(jù)權(quán)利要求2-8中任一所述的基于穩(wěn)定同位素和DNA宏條形碼技術(shù)的海洋食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)解析方法，其特征在于：還包括評估和預(yù)測步驟，評估食物網(wǎng)穩(wěn)定性，預(yù)測食物網(wǎng)發(fā)展方向。
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