[發明專利]布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物及應用

在審

• 申請號: 202310433397.2
• 申請日: 2023-04-21
• 公開（公告）號: CN116622866A
• 公開（公告）日: 2023-08-22
• 發明（設計）人: 李智偉;陳志強;王倩;李書靈;丁劍冰;張峰波
• 申請（專利權）人: 新疆維吾爾自治區人民醫院
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12R1/01
• 代理公司: 重慶一葉知秋專利代理事務所(普通合伙) 50277
• 代理人: 曲曉歡

本發明屬于生物檢測技術領域，具體公開了布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物，包括hsa?miR?11400、hsa?miR?199a?5p或hsa?miR?148a?5p中的一種或兩種以上；hsa?miR?11400的核苷酸序列為SEQ?ID?NO:3，hsa?miR?199a?5p的核苷酸序列為SEQ?ID?NO:5，hsa?miR?148a?5p的核苷酸序列為SEQ?ID?NO:7。本發明還公開了上述用于檢測上述布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物的試劑在制備檢測試劑盒中的應用，以及用于檢測布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物的試劑在制備檢測試劑盒中的應用。本發明公開的在布魯氏菌病中具有診斷潛力，為布魯氏菌病提供潛在的診斷生物標志物。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，尤其涉及布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物及應用。

背景技術

布魯氏菌病(Brucellosis，簡稱“布病”)是由布魯氏菌屬細菌侵入機體，引起人畜共患的傳染性變態反應性疾病，多因接觸患病的牛、羊等牲畜及其制品感染，發病隱匿、診斷延遲和致殘率高，對患者的健康尤其危險，不具有典型的臨床癥狀并易形成慢性感染性疾病。目前已經有12種布魯氏菌被報道，其中引起人類感染的最常見的布魯氏菌包括羊種、牛種和豬種，其中羊種布魯氏菌毒力最強。

隨著畜牧業的迅速發展，我國牲畜飼養量逐漸增加，畜牧產品的流通速度加快，使布魯氏菌病擴散速度增快，流行范圍也不斷擴大，布魯氏菌病感染已成為我國重要的公共衛生問題之一。

微小RNA(microRNA,miRNA)是一類約為22個核苷酸大小的非編碼單鏈RNA，對多種生物功能具有重要的調節作用，可作為疾病的分期、分級、疾病預測以及臨床干預措施監測等生物標志物。目前，布魯氏菌病患者的精確臨床診斷面臨著許多挑戰。血清miRNAs的表達水平往往與機體狀態存在密切關系，miRNAs有望成為布魯氏菌病精確診斷和預后判斷的良好標志物。近年來，國內外研究學者已發表了許多有關miRNAs作為生物標志的研究報道。但是相比于在腫瘤中已知的重要作用，miRNAs在感染性疾病尤其是細菌感染所致疾病中的作用研究還較少。

發明內容

本發明的目的在于提供布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物及應用，以解決上述技術問題。

本發明的目的之一在于提供布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物，包括hsa-miR-11400、hsa-miR-199a-5p或hsa-miR-148a-5p中的一種或兩種以上；hsa-miR-11400的核苷酸序列為SEQ?ID?NO:3，hsa-miR-199a-5p的核苷酸序列為SEQ?ID?NO:5，hsa-miR-148a-5p的核苷酸序列為SEQ?ID?NO:7。

本發明目的之二在于提供上述用于檢測上述布魯氏菌病的外泌體miRNA標志物的試劑在制備檢測試劑盒中的應用。

本發明的有益效果：本發明提供的外泌體hsa-miR-11400、hsa-miR-199a-5p和hsa-miR-148a-5p具有布魯氏菌病診斷潛力，可以作為布魯氏菌病精確診斷和預后判斷的生物標志物。

附圖說明

圖1為血清外泌體的鑒定；A：血清來源外泌體中標記蛋白CD9和TSG101的蛋白質印跡；B：使用Zetasizer納米zs90粒度儀測量的外泌體直徑；C：從血清中純化的外泌體的電子顯微照片(比例尺500nm)；

圖2為差異表達的血清外泌體miRNA的熱圖；

圖3為布魯氏菌病患者中五種外泌體miRNA的相對表達；A：hsa-miR-194-5p的表達水平；B：hsa-miR-11400的表達水平；C：hsa-miR-148a-5p的表達水平；D：hsa-miR-199a-5p的表達水平；E：hsa-miR-23b-3p的表達水平；