[發明專利]一種器官深度過冷保存方法

在審

• 申請號: 202310425815.3
• 申請日: 2023-04-19
• 公開（公告）號: CN116473050A
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 黃海水;李志杰;李云開
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 賀小停

本發明公開了一種器官深度過冷保存方法，屬于生物醫學工程領域技術領域，方法包括：將離體器官放入盛有保存液的容器中，使離體器官浸沒在保存液底部；加入密封油使得密封油置于保存液上層表面，靜置設定時間；靜置后吸取密封油和保存液交界面的氣泡，再將容器轉入設置好溫度的保溫設備中進行深度過冷保存；所述溫度?10℃。本發明方法可實現更低的過冷溫度，進一步降低生物樣品的代謝速率，增加保存時間，延長器官保存的時間、提高器官保存的質量。

技術領域

本發明屬于生物醫學工程領域技術領域，具體涉及一種器官深度過冷保存方法。

背景技術

目前大型器官的保存方法大致可以分為兩種：靜態低溫保存(Static?ColdStorage，SCS)、機械灌注(Machine?Perfusion，MP)。

靜態低溫保存的原理是將供體器官中的血液置換為器官保存液，并迅速將器官保存于低溫狀態(一般為4℃)。因為在低溫下，細胞的代謝以及酶類的活性維持在較低水平，器官的新陳代謝得到抑制，器官對缺血、缺氧等不利因素的耐受性增強，所以器官能在離體的狀態下保存一段時間。SCS是目前最常采用的器官保存方法。然而，SCS存在許多局限性，如保存時間短(24-36小時)，易引起細胞水腫、組織損傷、代謝物累積、酸中毒等不良反應，并且難以評估供體器官的功能和活力，器官修復的機會有限。

機械灌注的原理是將供體器官的血管與機械灌注系統相連，在器官保存、轉運階段通過該系統為器官持續提供代謝所需的營養物質并排除器官代謝產物。MP最主要的問題是設備復雜，價格昂貴，維護成本高，且攜帶和運輸不方便。

發明內容

為延長腎臟保存的時間、提高器官保存的質量，本發明提出了一種器官深度過冷保存方法，該方法可實現更低的過冷溫度，進一步降低生物樣品的代謝速率，增加保存時間。

為達到上述目的，本發明采用以下技術方案予以實現：

一種器官深度過冷保存方法，包括：

將離體器官放入盛有保存液的容器中，使離體器官浸沒在保存液底部；

加入密封油使得密封油置于保存液上層表面，靜置設定時間；

靜置后吸取密封油和保存液交界面的氣泡，再將容器轉入設置好溫度的保溫設備中進行深度過冷保存；所述溫度≤-4℃。

作為本發明進一步改進，所述保存液為UW液。

作為本發明進一步改進，所述保存液中還添加有0.1mol/l的SIB。

作為本發明進一步改進，所述保存液為添加0.1mol/L?SIB、5％?PEG和4％PVA(9kD)的UW溶液。

作為本發明進一步改進，所述密封油加入量滿足密封油完全覆蓋于保存液上層表面，且交界面沒有氣泡的殘留。

作為本發明進一步改進，所述密封油為礦物油、植物油或動物油。

作為本發明進一步改進，所述溫度為≤-4℃，深度過冷保存時間為≥7天。

作為本發明進一步改進，所述溫度為-10℃，深度過冷保存時間為4天。

作為本發明進一步改進，所述將離體器官放入盛有保存液的容器中之前還包括：對離體器官進行在體灌注，灌注液為去掉羥乙基淀粉的UW溶液。

作為本發明進一步改進，進行深度過冷保存后，還包括梯度溫度灌注復溫步驟，所述梯度溫度灌注復溫步驟包括：

復溫灌注液為DMEM培養基，先對腎臟進行t1時間的4℃培養基灌注，然后t2時間的26℃灌注，最后t3時間的37℃灌注。

與現有技術相比，本發明具有以下有益效果：