[發明專利]一種瀕危藏藥材矮紫堇的組織培養方法

在審

• 申請號: 202310418201.2
• 申請日: 2018-04-19
• 公開（公告）號: CN116391621A
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發明（設計）人: 白瑪玉珍;李淑萍;歐珠;衛華;強巴卓嘎;曾鈺婷;祁馳恒;許娟妮
• 申請（專利權）人: 西藏自治區農牧科學院蔬菜研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京恒律知識產權代理有限公司 11416
• 代理人: 王術娜

本發明涉及一種瀕危藏藥材矮紫堇的組織培養方法，通過將選好的植株芽體先后采用乙醇和HgCl₂溶液進行消毒，再采用無菌水沖洗，得到無菌外植體在無菌條件下依次進行接種、培養誘導叢芽、生根培養、煉苗移栽和定植，直至收獲得到矮紫堇藥材。本發明所述組織培養方法通過選用特定的培養基對矮紫堇進行組織培養填補矮紫堇組織培養技術空白，不受季節限制，可周年生產種苗，實現人工繁育。所述組織培養方法利用優質健壯矮紫堇的頂芽組織滅菌獲得的無菌組織通過分裂分化而獲得完形植株，成本低，繁殖快，能適應高原地區溫差大、氣溫低、紫外線強的獨特環境，并且育苗速度快，遺傳性好，可周年生產種苗。

本申請是申請日為2018年04月19日、申請號為201810353719.1、發明名稱為《一種瀕危藏藥材矮紫堇的組織培養方法》的分案申請。

技術領域

本發明屬于植物培養技術領域，具體涉及一種瀕危藏藥材矮紫堇的組織培養方法。

背景技術

矮紫堇是罌粟科植物矮紫堇(為干燥全草，表面棕紅色，棕黃色或暗褐紅色，莖短，蒴果長圓形)和扁柄黃堇(皺縮呈團狀，外表黃棕色至紅棕色，葉片破碎萎縮，花黃色細弱，苞片倒長卵形)的干燥全草，具有清熱消炎的功效。可以用于治療高山多血癥、潰瘍疼痛、脈管炎、腸炎。

矮紫堇主要分布于我國西藏海拔4200～5200m的區域。目前除西藏境內近百個藏醫醫療機構醫院制劑產品外，具有國藥準字號的藏藥產品中就有智托潔白丸、十三味青蘭散、二十五味鬼臼、十味龍膽花顆粒等40余品種要用到矮紫堇。同時僅在西藏自治區境內，就有近10家藏藥企業生產上述藏藥產品，年產量可達千噸，矮紫堇的年需求量可達10噸左右。但是，由于以全草入藥，長期掠奪式采挖野生藥材，已經導致原生環境遭到破壞，矮紫堇野生資源已經列入一級瀕危，處于供不應求的狀態。

現有方法中矮紫堇的人工繁育技術仍然是空白。

發明內容

為了解決現有技術存在的上述問題，本發明提供了一種育苗速度快、遺傳性好、繁殖周期短的瀕危藏藥材矮紫堇的組織培養方法。本發明所述組織培養方法填補矮紫堇組織培養技術空白，不受季節限制，可周年生產種苗，實現人工繁育。本發明組織培養技術利用優質健壯矮紫堇的頂芽組織滅菌獲得的無菌組織通過分裂分化而獲得完形植株，成本低，繁殖快，能適應高原地區溫差大、氣溫低、紫外線強的獨特環境，并且育苗速度快，遺傳性好，可周年生產種苗。

本發明所采用的技術方案為：

一種用于瀕危藏藥材矮紫堇組織培養的培養基，包括外植體培養基、叢芽培養基和生根培養基；

所述外植體培養基為MS培養基；

所述叢芽培養基以MS培養基為基礎培養基，還包括6-BA1mg/L和NAA0.01mg/L；

所述生根培養基以1/2MS培養基為基礎培養基，還包括6-BA0.2mg/L和NAA0.5～0.7mg/L；

或者所述生根培養基以1/2MS培養基為基礎培養基，還包括6-BA0.2mg/L和IAA0.5～0.7mg/L。

上述技術方案所述培養基在瀕危藏藥材矮紫堇快速繁殖中的應用。

一種快速繁殖瀕危藏藥材矮紫堇的組織培養方法，步驟包括：

(1)選健壯植株芽體，先用乙醇進行快速涮洗，再用HgCl₂溶液進行消毒；

(2)將步驟(1)處理后的芽體采用無菌水進行沖洗，再將芽體表面水吸干，得到無菌外植體，待用；

(3)在無菌條件下，將步驟(2)所述無菌外植體接種到培養基上，先進行暗培養，再轉接到叢芽培養基上，光照條件下培養誘導叢芽，形成叢芽；

(4)將所述叢芽轉入生根培養基中，在光照條件下，得到生根試管苗；