[發明專利]一種長雙歧桿菌凍干粉劑的制備方法及應用

在審

• 申請號: 202310405500.2
• 申請日: 2023-04-17
• 公開（公告）號: CN116410901A
• 公開（公告）日: 2023-07-11
• 發明（設計）人: 陳廷濤;王京蘇;王盛洲;王翠敏;林勇敢;劉文華
• 申請（專利權）人: 贛州京善科技合伙企業（有限合伙）
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;A61K35/745;A61K9/19;A61K47/36;A61P1/00;A61P1/12;C12R1/01
• 代理公司: 北京錦輝智通專利代理事務所(普通合伙) 16160
• 代理人: 馬紅

本發明涉及微生物或酶技術領域，具體公開了一種長雙歧桿菌凍干粉劑的制備方法及應用。該凍干粉劑是長雙歧桿菌經培養后加入凍干保護劑冷凍干燥得到的，發明人制備了一種海藻糖聚合物，海藻糖經聚合后其蛤殼構象經軸向連接形成剛性骨架，能夠將益生菌更好地保護起來，并且海藻糖聚合物的穩定性也有所提升，將海藻糖聚合物應用到凍干保護劑以制備長雙歧桿菌凍干粉劑，能夠提升菌體穩定性，延長活性。

技術領域

本發明涉及微生物或酶技術領域，具體涉及一種長雙歧桿菌凍干粉劑的制備方法及應用。

背景技術

結直腸癌(colorectal?cancer，CRC)是一種常見的消化道惡性腫瘤多發于乙狀結腸和直腸的交界處，即所謂的大腸癌。目前，針對CRC治療效果最好、研究較多的是外科和放療的綜合治療，包括術前放療、術中放療、術后放療、“三明治”式放療。化學治療為主的化療藥物包括：伊利替康、5-氟尿嘧啶、卡培他濱、奧沙利鉑等多種藥物。然而化療最常見的副作用就是胃腸道反應，表現為嚴重腹瀉、惡心、嘔吐、腹痛等。針對腹瀉這一并發癥，通常是由于化療后腸道內菌群紊亂和腸粘膜損傷導致的，腸道粘膜屏障是機體內外聯系的重要界面，若在各種病理因素作用下，腸粘膜受損，則引起腸內外多種炎性失調，尤其是潰瘍性結腸炎和感染性結腸炎。此外，化療在增加腸道炎癥的同時，不僅削弱屏障功能，還伴隨著腸道菌群組成改變，是菌群多樣性下降、抗炎細菌減少，可經腦腸軸影響大腦炎癥和功能。

有研究表明，作為天然益生菌的長雙歧桿菌同益生元、短鏈脂肪酸、多不飽和脂肪酸和酚類等可調節腸道菌群，促進腸道內穩態，恢復腸道內菌群的多樣性。長雙歧桿菌可能的作用機制包括與腸粘膜上皮細胞緊密結合，提高黏膜防御能力，促進上皮細胞分泌粘液使其形成黏液層，形成保護層阻止細菌的侵入和棲生菌易位，增強吞噬細胞對病原菌的吞噬以及非T細胞依賴性IgA的分泌等方面，從而減少腸道炎癥反應。此外，長雙歧桿菌還可以分解乳糖、纖維素等食物成分，產生有益物質如乳酸和醋酸，促進腸道健康。

中國專利申請201910504466.8公開了一種影響伊立替康所致小鼠腹瀉和腸道菌群的富硒益生菌，建立伊立替康所致腹瀉小鼠模型，通過長期灌胃給予富硒益生菌，評價其對伊立替康所致小鼠腹瀉及腸道菌群的影響。實驗組小鼠每天灌胃給予富硒益生菌，測定小鼠體重、腹瀉等級、小鼠免疫指標、腸道菌群以及回腸組織結構。結果表明，富硒益生菌能夠抑制伊立替康所致的體重下降和免疫功能降低；降低小鼠腹瀉發生率和平均腹瀉等級，緩解伊立替康所致的小鼠腹瀉；減少與β-D-葡糖醛酸糖苷酶相關的梭菌、大腸桿菌和擬桿菌含量，增加腸道內雙歧桿菌含量；緩解伊立替康導致的小鼠腸道粘膜、細胞和腺體的損傷。

中國專利202010622073.X公開了一種可提高雙歧桿菌耐酸性的凍干保護劑及其應用，屬于微生物技術領域。該發明提供了一種可顯著提高雙歧桿菌凍干存活率和耐酸性的凍干保護劑，此凍干保護劑的成分包含成分A和成分B，其中，成分A為海藻酸鈉、酪蛋白酸鈉或羧甲基纖維素鈉中的一種或一種以上，成分B為鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、山梨糖醇或棉子糖中的一種或一種以上；使用此凍干保護劑制備雙歧桿菌凍干粉時，雙歧桿菌的凍干存活率高達65.68％，并且，將使用此凍干保護劑制備得到的雙歧桿菌凍干粉用pH為3.0的模擬胃液處理2h后，雙歧桿菌存活率高達36.92％。