[發明專利]一種菜心恢復系材料的選育方法

在審

• 申請號: 202310384648.2
• 申請日: 2023-04-12
• 公開（公告）號: CN116267586A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 李光光;江定;張華;鄭巖松
• 申請（專利權）人: 廣州市農業科學研究院
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理有限公司 11562
• 代理人: 許佳

1.一種菜心恢復系材料的選育方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)雜交、自交分離：以攜帶恢復基因的油菜材料為母本，未攜帶恢復基因的菜心材料為父本，經雜交獲得F1代植株，再經自交分離獲得F2代植株；

(2)分子標記篩選：將步驟(1)獲得的F2代植株通過特異性擴增方法篩選出含有恢復基因的F2代植株；

(3)以步驟(2)篩選出的含有恢復基因的F2代植株為母本，重復步驟(1)-(2)經回交、自交分離和分子標記篩選6-8次進行選育，最終獲得菜心恢復系材料。

2.根據權利要求1所述的選育方法，其特征在于，在步驟(1)中，所述母本為攜帶Rfo基因的甘藍型油菜；所述父本為未攜帶Rfo基因的菜心自交系或菜心Ogu?CMS胞質不育系。

3.根據權利要求2所述的選育方法，其特征在于，所述甘藍型油菜的品系包括16C；所述菜心自交系的品種包括油綠703、油綠702或油綠501；所述菜心Ogu?CMS胞質不育系的材料包括玉田2號菜心或玉田3號菜心。

4.根據權利要求1所述的選育方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述分子標記篩選具體為：以所述F2代植株的DNA為模板，利用如SEQ?ID?NO：1-2所示的引物對進行特異性擴增，若擴增結果顯示出特異性條帶，則為含有恢復基因的F2代植株。

5.根據權利要求4所述的選育方法，其特征在于，所述特異性擴增的反應體系為：2μL10×PCR?reaction?Buffer、1.6μL?MgCl₂、引物對各1μL、0.15μL?Taq酶、0.4μL?dNTP、0.5μL模板DNA、ddH₂O補充至20μL。

6.根據權利要求4所述的選育方法，其特征在于，所述特異性擴增的程序為：95℃、3min；94℃、30s，55℃、30s，72℃、40s，33個循環；72℃、8min。