[發明專利]一種促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白-干細胞制劑

在審

• 申請號: 202310336773.6
• 申請日: 2023-03-31
• 公開（公告）號: CN116421710A
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發明（設計）人: 華進聯;寇正;李巴侖;趙獻軍;譚寧;艾力·艾爾肯;李琛琛;景遠翔;韓苗
• 申請（專利權）人: 百歐派（天津）生物技術有限公司;西北農林科技大學
• 主分類號: A61K38/39
• 分類號: A61K38/39;A61K35/28;A61P3/10;A61P17/02
• 代理公司: 西安科果果知識產權代理事務所(普通合伙) 61233
• 代理人: 張美松

本發明公開了一種促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白?干細胞制劑；是將傳代3?5代的脂肪間充質干細胞置于膠原蛋白培養液中，于37℃、5％CO₂培養至少5天；培養完成后得到膠原蛋白?干細胞制劑；所述的膠原蛋白培養液是10％FBSα?MEM培養液與膠原蛋白液以1：1體積比例混合，經超聲至液態并滅菌而得。本發明提供促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白?干細胞制劑，經皮膚愈合實驗表明添加膠原蛋白的間充質干細胞可以縮短糖尿病犬的傷口愈合時間，促進犬類皮膚損傷的修復。

技術領域

本發明屬于干細胞技術領域，涉及一種促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白-干細胞制劑。

背景技術

皮膚是保護機體免受外界病原體侵害的第一道屏障，并且具有調節體溫、控制排泄和合成維生素D等必要功能。當皮膚的完整性遭到破壞時，創面即刻啟動一系列復雜且高度協調的修復措施以促進損傷部位組織的愈合，在此期間創面容易受到多種因素干擾，導致傷口難以愈合，甚至喪失基本功能。創面的治療需要特定的醫療技術，有些甚至需要長期治療，這就構成了當代醫學的一個巨大挑戰。隨著寵物市場的擴大，犬貓等寵物和人類皮膚傷口愈合問題愈加嚴重。

糖尿病(Diabetes?Mellitus，DM)已經成為伴侶動物中常見的自發性復雜的代謝性內分泌疾病之一，有調研指出在犬和貓中患病率估計為0.26～1.33％。糖尿病所造成的傷口潰爛愈合難度高，易感染，這不僅可能延遲傷口愈合過程，還可能導致受影響患者的肢體截肢甚至更為嚴重的后果。使用不同的敷料，例如紗布、薄膜和組織工程皮膚替代物是目前的常規治療方法，負壓傷口治療、自體皮膚移植物和高壓氧傷口治療也是有效的治療手段。但是，這些方法有成本高、不能及時移除失活的組織和外科清創、氧中毒等限制性。為了規避傳統方法的局限性，應用干細胞已成為一種很有前途的方法。

發明內容

本發明解決的問題在于提供一種促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白-干細胞制劑，通過干細胞技術克服糖尿病寵物皮膚損傷愈合困難，促進糖尿病犬皮膚損傷修復。

本發明是通過以下技術方案來實現：

一種促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白-干細胞制劑，是將傳代3-5代的脂肪間充質干細胞置于膠原蛋白培養液中，于37℃、5％CO₂培養至少5天；培養完成后得到膠原蛋白-干細胞制劑；

所述的膠原蛋白培養液是10％FBSα-MEM培養液與膠原蛋白液以1：1體積比例混合，經超聲至液態并滅菌而得。

一種促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白-干細胞制劑的制備方法，包括以下操作：

1)用配置0.1M醋酸溶解膠原蛋白，室溫攪拌至膠原蛋白完全溶解，得到膠原蛋白溶液；

2)取無菌玻璃瓶，在瓶底部鋪上一層氯仿，將膠原蛋白溶液轉移到氯仿上層，氯仿體積為膠原蛋白溶液的10％，不能震蕩或攪拌；2-8℃靜置過夜；無菌操作下將上層膠原蛋白溶液轉移至無菌容器中，得到膠原蛋白原液；

3)將膠原蛋白原液的酸中和后，得到膠原蛋白液；

4)將10％FBSα-MEM培養液與膠原蛋白液以1：1體積比例混合，并超聲至液態，得到膠原蛋白培養液；然后送去輻照滅菌；

5)將傳代3-5代的脂肪間充質干細胞置于膠原蛋白培養液中，于37℃、5％CO₂培養至少5天；培養完成后得到膠原蛋白-干細胞制劑。

所述的促進糖尿病寵物皮膚創傷修復的膠原蛋白-干細胞制劑在制備寵物皮膚創傷修復藥物或制劑中的應用。

與現有技術相比，本發明具有以下有益的技術效果：