[發明專利]一種降低煙草上部葉中煙堿含量的方法

在審

• 申請號: 202310335043.4
• 申請日: 2023-03-31
• 公開（公告）號: CN116369145A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 林智慧;王雪仁;陳濤;鄧新發;林文貴;林建麒
• 申請（專利權）人: 福建省煙草公司三明市公司
• 主分類號: A01G22/45
• 分類號: A01G22/45;A01G7/06
• 代理公司: 福州旭辰知識產權代理事務所(普通合伙) 35233
• 代理人: 程春寶

本發明涉及微生物技術領域，特別是一種降低煙草上部葉煙堿含量的方法，主要是根據植物?微生物互作原理，將一株具有煙堿降解能力的煙草內生菌Rhizobium?sp.G16，轉接定殖于煙草內部，進而調控降低煙草植株上部葉中煙堿含量。通過該方法可明顯降解煙草植株上部葉的煙堿含量，提高其煙葉價值，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于微生物領域，特別涉及一種降低煙草上部葉中煙堿含量的方法。

背景技術

煙草是一種重要的葉用經濟作物，中國為世界第一煙草大國，煙葉產量約占世界總量的35％。盡管我國具有廣闊的煙葉種植面積，但所產高品質煙葉所占的比重卻并不高。近年來，經過多方努力，我國部分煙區的煙葉在外觀質量上已接近或達到美國、加拿大、津巴布韋、巴西等先進產煙國的水準，但就其內在質量而言還有一定差距,其中一個較普遍且突出的問題就是煙堿含量偏高。煙堿是衡量煙草品質的重要因素，正常情況下的煙堿含量烤煙應低于3％，白肋煙應在2％～4％，而我國烤煙煙堿含量普遍偏高，尤其是上部煙葉的煙堿含量更為偏高，達到3％～4％，白肋煙煙堿含量甚至高達6％。偏高的煙堿含量影響了煙葉質量和煙葉的工業可用性，因而如何降低煙葉中煙堿含量已成為煙草行業急需解決的問題。

截止目前，國內相關學者已就如何降低煙葉煙堿含量進行了大量的研究工作。而從相關內容來看，主要分為以下幾個方面。(1)從農業種植的角度出發，通過低煙堿品種選育、平衡氮肥施用量、打頂抹杈、預留煙葉等技術手段對煙堿含量進行調控，該類方法雖然被認為是提升煙草品質的基本手段，但實施過程中由于易受環境條件的干擾，往往效果并不明顯，同時一些改良技術所需的作用周期又過長，也使得該類方法的推廣受到了制約；(2)利用物化方法進行調控。此類方法主要針對的是已采摘的中低品位煙葉，通過熱水漂洗、溶劑萃取、氣體抽提、濾嘴過濾以及打孔稀釋等物理化學方法來降低成品煙葉中煙堿的含量，但實施的同時也會導致煙草中部分致香成分的損失和外觀色澤的顯著變化，從而在一定程度上降低了處理煙葉的可用性；(3)利用微生物技術進行調控。該類方法主要通過從土壤和煙草廢棄物中分離能夠降解煙堿的微生物，培養后直接作用于煙葉，降低其煙堿含量，從而提高煙葉的可用性。但該技術的生物安全性卻有待考良，特別是來源于土壤或煙草廢棄物中的一些致病菌也被發現具有煙堿降解能力。

近年來，隨著研究的不斷深入，一些生長在煙草內部的內生菌引起了人們的廣泛關注。相關研究表明，這些內生菌不但會對宿主的生長、抵御病害、抗脅迫起到促進作用，更是在煙堿及風味成分等次生代謝物質的形成過程中扮演著重要角色。這一發現無疑為微生物技術調控煙葉中煙堿數量提供了一個全新的思路。如果能從煙草內部分別篩選具有降煙堿作用的內生功能菌，將其大量轉接至煙草內部，不但能調控煙堿數量，同時由于這些內生菌本身就來源于煙草體內，可直接定殖于煙葉之中，并且不會對煙葉外觀質量產生影響。

綜上所述，利用煙草內生功能菌形成降煙堿復合內生菌劑，可以有效解決目前微生物降解煙堿技術所面臨一系列問題，具有廣闊的研究應用前景。

發明內容

本發明為了彌補現有技術的不足，提供了一種降低煙草上部葉煙堿含量的方法，通過該方法可明顯降解煙草植株上部葉的煙堿含量，提高其煙葉價值。

本發明是通過如下技術方案實現的：

一種降低煙草上部葉煙堿含量的方法，主要是根據植物-微生物互作原理，將一株具有煙堿降解能力的煙草內生菌Rhizobium?sp.G16，轉接定殖于煙草內部，進而調控降低煙草植株上部葉中煙堿含量。煙草內生菌Rhizobium?sp.G16的詳細信息見《一株高效煙堿降解內生菌的分離及降解特征研究》(中國煙草科學，2021,42(1):79-85)；所述煙草內生菌經鑒定為Rhizobium?sp.G16，GenBank登錄號為MN712240。

進一步的，所述煙草內生菌的使用形式為液態菌懸液。

進一步的，包括如下步驟：