[發明專利]用于污染農田治理的含多價噬菌體土壤修復劑及制備方法

在審

• 申請號: 202310303983.5
• 申請日: 2023-03-27
• 公開（公告）號: CN116355622A
• 公開（公告）日: 2023-06-30
• 發明（設計）人: 趙遠超;萬金忠;張勝田;李群;周艷;靳苗苗
• 申請（專利權）人: 生態環境部南京環境科學研究所
• 主分類號: C09K17/40
• 分類號: C09K17/40;C12N7/00;C12N7/02;A01N63/40;A01P1/00;C12R1/92;C09K101/00
• 代理公司: 北京彥開專利代理事務所(普通合伙) 16149
• 代理人: 劉婷

本發明公開了用于污染農田治理的含多價噬菌體土壤修復劑及制備方法，屬于土壤修復技術領域，用于污染農田治理的含多價噬菌體土壤修復劑，所述修復劑由以下重量份的成分組成：10?15份多價噬菌體YSZ1R原液和13?20份多價噬菌體YSZ5K原液、7?9份脫氧核苷酸溶液、10?15份玉米芯渣、8?12份大豆秸稈根渣、11?13份動物油脂、4?7份瓊脂塊、4?9份葡萄糖、5?7份氨基酸溶液、7?13份無機鹽溶液；土壤修復劑的制備方法包括：S1、制備多價噬菌體原液；S2、制備營養液；S3、多價噬菌體的轉移；本發明通過噬菌體對病菌進行消除，大量的噬菌體在殺死病菌后，會自然消亡，不會對土壤造成新的污染。

技術領域

本發明涉及土壤修復技術領域，具體是涉及用于污染農田治理的含多價噬菌體土壤修復劑及制備方法。

背景技術

由于我國現階段畜禽糞便安全化處理技術或環境管理仍存在一定的不足或缺失，許多城郊畜牧業養殖廠周邊的農田土壤常成為殘留和滋生人畜共患抗性細菌的高風險熱點區域，嚴重影響人體健康和環境安全。因而，針對抗性細菌污染農田土壤，開展必要的微生物修復技術研究非常迫切。

噬菌體療法為修復上述污染土壤提供了一種全新途徑。細菌噬菌體是一類較為專屬捕食活體宿主細菌而存活的生物體，在土壤、水、空氣乃至人/動物體表或腸道內均廣泛分布了大量噬菌體，據估算其總量達到10³¹數量級。噬菌體療法是指通過分離、篩選、純化和富集宿主細菌的專屬噬菌體之后，向污染土壤中添加特定噬菌體菌液，定向侵染滅活抗性細菌的修復方式。國外學者已成功將噬菌體療法應用在滅活辣椒、番茄、葡萄等果蔬的植物病害細菌或人畜共患抗性細菌的食品安全保障領域。然而，使用噬菌體療法來削減土壤中抗性細菌的生物修復技術研究則相對較少。此外，現有研究常認為噬菌體僅限于侵染某一“種”類的宿主細菌，而近年來學術界發現：一些噬菌體經過適當的基因改造或人工加速其寬宿主譜的表達，可針對同一“屬”內幾種高度同源性的宿主細菌，甚至針對不同種屬之間的宿主細菌也具有一定廣譜性捕食區間。這為噬菌體療法廣泛應用提供了有效地理論支撐。

通過農藥對污染土壤中病菌進行修復，在修復污染土壤后，土壤內會殘留大量農藥，成為新的土壤污染源，而且農藥在清除病菌的同時，還會殺死大量土壤中有益的微生菌，破壞土壤微生物生態環境，因此需要一種安全可靠的土壤修復劑，且不會對土壤造成新的污染。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供了用于污染農田治理的含多價噬菌體土壤修復劑及制備方法。

本發明的技術方案是：用于污染農田治理的含多價噬菌體土壤修復劑，所述修復劑由以下重量份的成分組成：10-15份多價噬菌體YSZ1R原液和13-20份多價噬菌體YSZ5K原液、7-9份脫氧核苷酸溶液、10-15份玉米芯渣、8-12份大豆秸稈根渣、11-13份動物油脂、4-7份瓊脂塊、4-9份葡萄糖、5-7份氨基酸溶液、7-13份無機鹽溶液；

所述玉米芯渣的粒度為2-5mm，所述大豆秸稈根渣的粒度為1-2mm，所述葡萄糖粉的粒度為80-100μm，瓊脂塊的粒度為5-10cm。

進一步地，上述的用于污染農田治理的含多價噬菌體土壤修復劑的制備方法，包括以下步驟：

S1、制備多價噬菌體原液：

將多價噬菌體YSZ1R與LB培養液按質量比1:1混合，得到混合液A，多價噬菌體YSZ5K與LB培養液按質量比1:1混合，得到混合液B，將混合液A和混合液B分別在25-35℃下搖床培養8-12h后，得到多價噬菌體YSZ1R原液和多價噬菌體YSZ5K原液；

S2、制備營養液：

按上述重量份取動物油脂玉米芯渣、大豆秸稈根渣、瓊脂塊加入至混料器中，混料器混料溫度為80-100℃，混料過程中按上述重量份的成分加入無機鹽溶液，攪拌持續1-2h，待各物料混合均勻后，降低混料器溫度至25-30℃，按上述重量份的成分加入葡糖糖、氨基酸液、脫氧核苷酸溶液，再持續攪拌30-40min后得到營養液；