[發明專利]Cs-miR397a靶定CsLAC1基因在調控茶樹輪斑病菌敏感性中的應用

在審

• 申請號: 202310288584.6
• 申請日: 2023-03-21
• 公開（公告）號: CN116376929A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 劉升銳;朱佳鑫;韋朝領;朱俊彥;李方東;張紅秀;李國強
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00;A01H6/00
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 呂永齊

本發明屬于植物分子生物技術和基因工程技術領域。本發明提供了Cs?miR397a靶定CsLAC1基因在調控茶樹輪斑病菌敏感性中的應用，所述CsLAC1基因編碼的蛋白包括如SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列。本發明以CsLAC1基因為靶基因，通過抑制CsLAC1基因表達且進行輪斑病菌侵染后的生理指標，發現抑制CsLAC1基因表達后的茶樹葉片相較于對照組NBT染色效果更明顯，ROS清除系統的關鍵酶POD活性低于對照組，抑制CsLAC1基因表達后的茶樹葉片對輪斑病菌更加的敏感，為茶樹抗病育種具有重要意義。

技術領域

本發明屬于植物分子生物技術和基因工程技術領域，具體涉及CsLAC1基因在調控茶樹輪斑病菌敏感性中的應用。

背景技術

茶樹(Camellia?sinensis(L.)O.Kuntze)是重要的葉用經濟作物并逐漸在世界范圍內被廣泛種植。茶輪斑病作為茶園病害之一，嚴重危害茶樹嫩葉及老葉，造成茶園減產，降低茶農收入。目前對茶輪斑病的研究主要集中于使用比較轉錄組學，從轉錄水平對不同抗性的茶樹品種進行比較，并未尋找在不同抗性的茶樹品種中差異表達的基因。但是使用比較轉錄組學進行抗性比較的方法較為繁瑣，并且不能準確鑒定茶樹品種。

在茶樹基因組中還有許多與防御反應相關的基因有待發掘，其內在的分子調控機制也尚不清楚。尋找差異表達基因，以期發現調控輪斑病的靶基因，為茶樹抗病育種提供基因資源具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供Cs-miR397a靶定CsLAC1基因在調控茶樹輪斑病菌敏感性中的應用，解析茶樹防御反應的分子機制，為茶樹抗病育種提供基因資源。

本發明提供了CsLAC1基因在調控茶樹輪斑病菌敏感性中的應用，所述CsLAC1基因編碼的蛋白包括如SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列。

優選的，所述調控茶樹輪斑病菌敏感性包括：負調控CsLAC1基因的表達增加茶樹對輪斑病菌的敏感性。

本發明提供了CsLAC1基因輔助選育抗輪斑病茶樹品種和/或制備輪斑病敏感茶樹模型中的應用，所述CsLAC1基因編碼的蛋白包括如SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列。

本發明提供了一種輪斑病敏感茶樹模型，所述輪斑病敏感植物模型含有抑制CsLAC1基因表達的產品。

優選的，所述產品包括miRNA和/或反義寡核苷酸。

本發明提供了一種抑制CsLAC1基因表達的Cs-miR397a，所述Cs-miR397a的成熟體包括如SEQ?ID?NO.3所示的核苷酸序列。

優選的，所述Cs-miR397a的前體包括如SEQ?ID?NO.4所示的核苷酸序列。

本發明提供了一種抑制CsLAC1基因表達的植物表達載體，所述植物表達載體包括上述技術方案所述Cs-miR397a的前體核苷酸序列和出發載體；

所述Cs-miR397a的前體包括如SEQ?ID?NO.4所示的核苷酸序列。

本發明提供了一種抑制CsLAC1基因表達的反義寡核苷酸，所述反義寡核苷酸包括如SEQ?ID?NO.5或SEQ?ID?NO.6所示的核苷酸序列。

本發明還提供了上述技術方案所述的Cs-miR397a、表達載體或反義寡核苷酸在下述(Ⅰ)～(Ⅲ)中的任意一種或多種中的應用：

(Ⅰ)調控茶樹CsLAC1基因表達；

(Ⅱ)輔助選育抗輪斑病茶樹品種；

(Ⅲ)制備輪斑病敏感茶樹模型。