[發(fā)明專利]拉莫三嗪完全抗原和抗體及其制備方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310246532.2
• 申請日: 2023-03-09
• 公開（公告）號: CN116375845A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李忠鵬;何揚錦;陳穎;費曉旭
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江準策生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K14/77;C07K16/44;C12N5/20;G01N33/543;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/53;C12R1/91
• 代理公司: 湖州果得知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33365
• 代理人: 湯荷芬

1.拉莫三嗪完全抗原，其特征在于，所述完全抗原具有式1所示的結(jié)構(gòu)：

其中，Protein為蛋白質(zhì)載體。

2.一種制備權(quán)利要求1所述拉莫三嗪完全抗原的方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(1)將拉莫三嗪半抗原與牛血清白蛋白(BSA)或卵清蛋白(OVA)連接，以制得權(quán)利要求1所述的拉莫三嗪完全抗原；

(a)使拉莫三嗪半抗原用N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶解為A液；

(b)將步驟(a)得到的A液、25-25％戊二醛加入至BSA/OVA溶液中，室溫反應(yīng)1.5-2.5h，制得拉莫三嗪-BSA/OVA偶聯(lián)物，即拉莫三嗪完全抗原。

3.一種權(quán)利要求1所述拉莫三嗪完全抗原的用途，其特征在于，其用于制備拉莫三嗪的特異性單克隆抗體。

4.一種單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體特異性結(jié)合拉莫三嗪；所述單克隆抗體由小鼠雜交瘤細胞系產(chǎn)生。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種單克隆抗體，其特征在于，所述雜交瘤細胞系由中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，中國，武漢，武漢大學)保藏，保藏號為CCTCCNO:C2022381。

6.一種如權(quán)利要求4或5所述的單克隆抗體的雜交瘤細胞系，其特征在于，所述雜交瘤細胞系是由中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，中國，武漢，武漢大學)保藏，保藏號為CCTCCNO:C2022381的小鼠雜交瘤細胞系。

7.一種如權(quán)利要求4或5所述的單克隆抗體的用途，其特征在于，用于制備檢測樣品中拉莫三嗪的試劑、檢測卡或試劑盒。

8.一種檢測生物樣品中是否存在拉莫三嗪的方法，其特征在于，所述方法包括步驟：

(a)將所述生物樣品與權(quán)利要求4或5所述的單克隆抗體接觸；

(b)檢測是否形成抗原-抗體復合物，其中形成復合物就表示樣品中存在拉莫三嗪；

其中，所述單克隆抗體帶有可檢測標記物；所述的標記物選自下組：膠體金標記物、有色標記物或熒光標記物；所述檢測方法為熒光檢測法。

9.一種檢測拉莫三嗪類似物的熒光免疫層析檢測卡，所述檢測卡包括基片；吸液部件；檢測部件；加樣部件，其特征在于，檢測部件固定在基片上，在檢測部件中部設(shè)置質(zhì)控帶和檢測帶，在檢測部件的兩端以部分重疊的方式固定吸液部件和加樣部件，其中，檢測帶上包被有權(quán)利要求1所述的完全抗原，質(zhì)控帶上包被有兔抗原IgG；所述拉莫三嗪熒光免疫層析檢測卡還包括卡盒，所述卡盒由下蓋和上蓋組成，上蓋設(shè)有加樣窗口和檢測窗口，所述拉莫三嗪熒光免疫層析檢測卡完全設(shè)置于下蓋中，所述檢測窗口和加樣窗口分別對應(yīng)與所述拉莫三嗪熒光免疫層析檢測卡上的加樣部件和質(zhì)控帶及檢測帶。

10.一種檢測拉莫三嗪類似物的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒裝有：

(a)權(quán)利要求9所述的拉莫三嗪熒光免疫層析檢測卡；

(b)與權(quán)利要求9所述的拉莫三嗪熒光免疫層析檢測卡配套的拉莫三嗪檢測分析液；

(c)所述拉莫三嗪檢測試劑盒檢測拉莫三嗪類似物的使用說明書；

其中，所述檢測分析液為包含有熒光標記的權(quán)利要求4或5所述的單克隆抗體和抗兔IgG抗體的檢測分析液；

所述檢測分析液中的標記用熒光染料包括但不限于，Alexa?Fluor?647、CF^TM647、TRITC(Rhodamine)等。