[發明專利]水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7突變體構建及其應用

在審

• 申請號: 202310245629.1
• 申請日: 2023-03-15
• 公開（公告）號: CN116286954A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 程金平;尹璐;張紅生;李爽;李潤;閆雨濛;朱沛文;陳永吉;陳孫祿;鮑永美;黃驥
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/29;C12N15/11;A01H6/46;A01H5/10;C12Q1/6895
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 競存;徐冬濤

1.敲除水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7在提高水稻種子活力中的應用。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，敲除水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7在正常條件和/或在鹽條件下提高水稻種子活力。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述提高種子活力包括提高種子萌發率和/或提高種子萌發指數和/或提高成苗率和/或改良水稻種子活力遺傳特性。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

5.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7編碼的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

6.一種提高水稻種子活力的方法，其特征在于，所述方法為基于CRISPR/Cas9基因編輯技術構建水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7敲除突變體，獲得提高水稻種子活力的植株。

7.據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)水稻基因OsGA2ox7突變體轉基因構建：篩選水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7的敲除靶位點，根據敲除靶位點，設計OsGA2ox7靶位點敲除引物，獲得OsGA2ox7基因的點突變目標片段靶序，構建載體后轉化水稻，獲得水稻OsGA2ox7?CRISPR/Cas9突變體；

(2)水稻突變體篩選與鑒定：采用靶點檢測引物擴增水稻OsGA2ox7?CRISPR/Cas9突變體幼葉中基因組，進行常規PCR產物測序，篩選純合突變體植株，即為提高水稻種子活力的植株。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，水稻赤霉素分解基因OsGA2ox7的敲除靶位點1如SEQ?ID?NO.3所示，敲除靶位點2如SEQ?ID?NO.4所示。

9.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，敲除引物序列如SEQ?ID?NO.5-SEQ?IDNO.8所示。

10.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，靶點檢測引物如SEQ?ID?NO.10和SEQ?IDNO.11所示。