[發明專利]一種用于檢測達卡氣單胞菌的引物組、試劑盒、方法及應用在審
| 申請號： | 202310244076.8 | 申請日： | 2023-03-15 |
| 公開（公告）號： | CN116516031A | 公開（公告）日： | 2023-08-01 |
| 發明（設計）人： | 徐先棟;付輝云;黃江峰;周智勇 | 申請（專利權）人： | 江西省水產科學研究所（江西省鄱陽湖漁業研究中心;江西省漁業資源生態環境監測中心） |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 南昌大牛知識產權代理事務所(普通合伙) 36135 | 代理人： | 劉俊文 |
| 地址： | 330000 江西*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 達卡 氣單胞菌 引物 試劑盒 方法 應用 | ||
1.一種用于檢測達卡氣單胞菌的引物組，其特征在于，所述引物組包括上游引物DK1F和下游引物DK1R，所述上游引物DK1F的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，所述下游引物DK1R的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示；所述引物組的靶標基因為達卡氣單胞菌的DK1，所述DK1的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示。
2.權利要求1所述的引物組在制備檢測達卡氣單胞菌的產品中的應用。
3.一種檢測達卡氣單胞菌的試劑盒，其特征在于，包括權利要求1所述的引物組。
4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，還包括TaqDNA聚合酶和ddH2O。
5.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，還包括陽性對照品和陰性對照品。
6.一種非診斷或治療目的的檢測達卡氣單胞菌的方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)提取樣品DNA，采用權利要求1所述的引物組進行PCR擴增；(2)凝膠電泳檢測PCR擴增產物，根據電泳后條帶判斷樣品中是否存在達卡氣單胞菌。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR反應條件為：94℃預變性4mi?n，然后94℃變性30s，65℃退火30s，72℃延伸1min，35個循環后，再在72℃延伸反應7min。
8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR的反應體系為25μL，包括2×PCRMix?12.5μL，所述上游引物DK1F?1μL，所述下游引物DK1R?1μL，ddH2O?8.5μL，模板2μL。
9.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，采用瓊脂糖凝膠電泳進行檢測。
10.權利要求6至9任一項所述的方法在檢測水體或動物組織中的達卡氣單胞菌中的應用。
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