[發明專利]一種防治煙草黑脛病的復合菌制劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202310219846.3
• 申請日: 2023-03-02
• 公開（公告）號: CN116058386A
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 黎妍妍;楊春雷;楊勇;常曉涵;文丁鋅;李錫宏;李方明;張友臣
• 申請（專利權）人: 湖北省煙草科學研究院
• 主分類號: A01N63/22
• 分類號: A01N63/22;A01N63/27;A01N59/16;C12N1/20;A01G13/00;A01G7/06;A01G22/45;C12R1/085;C12R1/39
• 代理公司: 南京鼎傲知識產權代理事務所(普通合伙) 32327
• 代理人: 劉煥敏

本發明提供了一種防治煙草黑脛病的復合菌制劑及其制備方法，所述復合菌制劑包括蠟樣芽胞桿菌、熒光假單胞菌和氯化鈷。所述蠟樣芽胞桿菌和熒光假單胞菌分別由蠟樣芽胞桿菌ATCC?9634和熒光假單胞菌ATCC?13525發酵制備得到，按照一定的配比菌劑和氯化鈷，可以提高復合菌制劑的防治效果。本發明制備的復合菌制劑用于防治煙草黑脛病防治效果可達95％以上，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種能防治煙草黑脛病的復合微生物菌劑及其制備方法。

背景技術

煙草黑脛病俗稱爛腰、黑根，是煙草生產上常見的危害最嚴重的重要病害之一。煙草黑脛病是一類土傳真菌性病害。該病在我國各煙草種植區廣泛發生，危害較為普遍。近年由于連作煙田面積擴大，連作年限增長，不少地方煙草黑脛病有加重流行的趨勢。感染煙草黑脛病的植株通常癥狀為矮化、萎蔫、葉片發黃、根和莖基部壞死。

黑脛病由煙草疫霉引起，在苗期和大田期均可發病，在煙草連作年限長以及品種過度集中的情況下，更容易發病。針對黑脛病疫病的防治方法可分為土壤防治法、生物防治法、化學防治法、藥劑防治法以及多種方法聯用的綜合防治法。

利用拮抗微生物來防治煙株病害從而減輕病菌對農作物的危害，可以減輕因過度使用化學農藥造成的污染，已成為煙株病害綜合防治的一種重要措施，尤其是對典型的土傳型病害，如煙草黑脛病。拮抗微生物在種植土壤中定殖并形成優勢群體，可以抑制煙株病原菌的繁殖和生長，從而保護煙株根系免受病原菌的侵染。

對煙草黑脛病菌具有拮抗作用的細菌有芽孢桿菌和假單胞桿菌，主要通過產生抗菌素而使煙草黑脛病菌菌絲溶解。現在使用的菌株主要是通過天然篩選得到，實際使用中普遍存在產抗菌素低，難以高效抑制病原菌。

生物防治法中，主要是通過大量篩選或者偶然發現具有防治功效的菌株，這就造成相應菌株的發現及其困難，從而使得生物防治法的研究進展較慢。采用生物防治雖然能夠避免一些環境或者農藥問題，但相對于化學防治而言，生物防治法所得的防效普遍偏低。有文獻報道常用的化學藥劑，對黑脛病的防效均可達到70％以上，而生物防治法卻較難獲得70％以上的防效。

一些研究者還研究了將特定的微生物和化學藥物聯合在煙草疫病方面的防治效果。如劉劍金等人認為將解淀粉芽孢桿菌YN48與氟嗎·乙鋁、精甲霜·錳鋅聯合，可能具有較好的防治效果。不過，微生物與藥物聯合，往往還會出現防效降低的情況，這可能是因為化學藥物極易抑制微生物的生長或者與微生物代謝產物發生拮抗作用所致，如徐玉茹等人發現在木霉菌的基礎上加入甲霜·錳鋅后，防治效果出現了大幅下降。

綜上所述，本領域亟需針對現有生物防治法面臨的缺點，提供一種防效高、改善煙草生長性狀并提高煙草品質的微生物土壤改良菌劑技術。

發明內容

本發明要解決的技術問題在于克服現有微生物制劑防治煙草黑脛病效果不佳的缺陷，提高煙草抗病能力。

本發明提供一種防治煙草黑脛病的復合菌制劑，由蠟樣芽胞桿菌(BacillusCereus)、熒光假單胞菌(Pseudomonas?fluorescens)和氯化鈷組成。

在本發明的一些實施例中，所述復合菌制劑中氯化鈷含量是10g/kg。

在本發明的一些實施例中，所述復合菌制劑中蠟樣芽胞桿和熒光假單胞菌的菌粉按照3：2的質量比混合而成。

在本發明的一些實施例中，所述復合菌制劑的制備方法包括：

以蠟樣芽胞桿菌ATCC?9634,熒光假單胞菌ATCC?13525為菌種，將菌種分別進行活化；

將菌種進行培養，得蠟樣芽胞桿菌和熒光假單胞菌種子液；

將種子液進行培養，得蠟樣芽胞桿菌和熒光假單胞菌發酵液；

將發酵液進行離心，得蠟樣芽胞桿菌和熒光假單胞菌的離心菌體；