[發明專利]瘡痂鏈霉菌噬菌體φS102的應用

在審

• 申請號: 202310209509.6
• 申請日: 2021-06-22
• 公開（公告）號: CN116355862A
• 公開（公告）日: 2023-06-30
• 發明（設計）人: 孫子羽;郝文勝;滿都拉;陳忠軍;袁芳
• 申請（專利權）人: 內蒙古農業大學
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12N7/02;A01N63/40;A01P1/00;C12R1/92
• 代理公司: 深圳中細軟知識產權代理有限公司 44528
• 代理人: 王金鳳

本發明涉及一種長尾寬宿主譜鏈霉菌強裂解性噬菌體及其在防治馬鈴薯瘡痂病藥物中的應用。本發明所述的長尾寬宿主譜鏈霉菌強裂解性噬菌體，屬于長尾噬菌體科，對寬宿主譜鏈霉菌具有較強的裂解性，效價高。本發明所述的長尾寬宿主譜鏈霉菌強裂解性噬菌體用于防治馬鈴薯瘡痂病，安全性好，效果好，無污染。所述噬菌體防治馬鈴薯瘡痂病的實驗結果表明：對照組結痂病變覆蓋率平均為28.5％左右，相比之下，噬菌體處理組的塊莖后代的病變覆蓋率僅為3.5％，顯著降低(p0.05)。通過噬菌體處理，每個塊莖的損傷類型和損傷數量也顯著減少(p0.05)。噬菌體處理和未處理的塊莖在塊莖重量、大小或數量上沒有顯著差異。

本發明為“一種長尾寬宿主譜鏈霉菌強裂解性噬菌體及其在防治馬鈴薯瘡痂病藥物中的應用(申請號2021106907012，申請日：2021年06月22日)”的分案申請。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種瘡痂鏈霉菌噬菌體的應用。

背景技術

馬鈴薯瘡痂病是由病原鏈霉菌(S.scabies、S.galilaeus、S.bobili等)引起的植物性病害，其危害馬鈴署塊莖，導致塊莖表面出現近圓形至不定形木栓化瘡痂狀淡褐色病斑或斑塊，手摸質感粗糙；通常病斑僅限于皮層，有時匍匐莖也可受害，使被害薯塊質量和產量降低，不耐貯藏，且病薯外觀不雅，商品品級大為下降。雖然通過實施合理布局、推廣抗病品種、種薯處理、切刀消毒、建立種薯田、中耕培土、噴藥保護等綜合防治措施，能使馬鈴薯細菌性病害得到有效控制，但多個環節的處理一方面加大了勞動強度，使產業成本居高不下；另一方面，農藥的大量使用造成了超級抗藥菌的出現和環境的嚴重污染以及商品薯農藥殘留超標等多種問題，故為了支撐國家馬鈴薯主糧化戰略及馬鈴薯產業的健康發展，亟需研制高效、安全、環保的用于馬鈴薯細菌病害防控的新技術及新藥劑。

噬菌體是感染細菌、真菌、藻類、放線菌或螺旋體等微生物的病毒的總稱，在數目上超出細菌十倍左右。目前，噬菌體有望作為抗菌劑替代抗生素和農藥以解決日益嚴重的病原細菌耐藥性問題；同時，由于噬菌體具備特異性強、易于分離和增值、遺傳毒性低、耐受食品加工環境等特點，也被期望作為一種理想的生物防腐劑或檢測手段用于諸多領域。噬菌體增殖快，定殖病原宿主后，就不需要再次補充噬菌體。病原菌感染了相應的某種噬菌體后，可能會像患了惡性腫瘤一樣，無法治愈，這樣就可以把原來不屬于某個地方的相應的病害根除，維持當地原有的生態環境。相比于采用農藥控制病害的擴展和蔓延，不論是從環境友好性，還是減少生產成本方面來說，噬菌體是一種更好生物防治方法。

發明內容

為了解決現有技術存在的以上問題，本發明提供了一種安全、有效、無污染的噬菌體及其在防治馬鈴薯瘡痂病藥物中的應用。所述噬菌體屬于長尾噬菌體科，對寬宿主譜鏈霉菌具有較強的裂解性，效價高。

本發明所采用的技術方案為：

瘡痂鏈霉菌噬菌體(Streptomyces?phage)該菌株于2021年4月15日保藏于中國典型培養物保藏中心(地址：中國武漢.武漢大學，郵編430072)，保藏編號為CCTCCNO:M?2021379。

所述噬菌體具有呈多面體的頭部結構和無收縮性的尾部，頭部直徑約64±7nm，尾部長約196±8nm，所述噬菌體屬于長尾噬菌體科。

所述噬菌體在pH為2-10范圍內具有活性，所述噬菌體在30℃-80℃時活性穩定，大于80℃則失活。

所述噬菌體的潛伏期為20min，爆發期為60min。

所述噬菌體在MOI為0.01時，其效價為1.47×10⁷。

所述的長尾寬宿主譜鏈霉菌強裂解性噬菌體的分離純化方法，具體如下：

(1)樣品前處理：