[發明專利]針對豚鼠IFN-γ的單克隆抗體及其用途

在審

• 申請號: 202310188659.3
• 申請日: 2023-02-28
• 公開（公告）號: CN116376845A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 陳瑞愛;鑫婷;丁家波;張廣智;范學政;熊挺;劉郁夫;梁琳;楊潔
• 申請（專利權）人: 嶺南現代農業科學與技術廣東省實驗室肇慶分中心;中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/24;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;A61K39/395;C12R1/91
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 李素蘭

本發明涉及藥及動物病檢測技術領域，具體而言，本發明涉及一種針對豚鼠IFN?γ的單克隆抗體，其與IFN?γ的結合特異性強，為采用其進行IFN?γ的測定提供了良好的基礎，進而也為結核菌素效價標定提供了良好的基礎。相應的，本發明還公開了分泌該單克隆抗體的雜交瘤細胞株GIFN?1A2。本發明還公開了包括該單克隆抗體的藥物、試劑盒。

技術領域

本發明涉及醫藥及動物病檢測技術領域，尤其涉及一種針對豚鼠IFN-γ的單克隆抗體及其用途。

背景技術

牛結核病(Bovine?Tuberculosis)主要由結核分枝桿菌復合群(Mycobacteriumtuberculosis?comples，MTBC)成員——牛分枝桿菌(M.bovis)感染引起的一種人獸共患慢性傳染病。禽結核病(Avian?Tuberculosis)主要由血清1、2、3、6型禽分枝桿菌(Mycobacterium?avium)和日內瓦分枝桿菌(Mycobacterium?genavens)感染引起。禽分枝桿菌主要感染家禽、觀賞鳥，貓頭鷹、禿鷲等野禽，豬、寵物犬等動物，還可以感染人，特別是免疫力低下的兒童、老人、HIV感染者，引起多組織器官的結核結節。牛結核病和禽結核病不僅危害養殖業的健康發展，更引起嚴重的公共衛生安全問題，威脅人民的健康和生命安全，其有效防控直接關系著人類健康。

牛結核菌素皮試試驗(Tuberculin?Skin?Test，TST)是最早被用來診斷牛結核病的方法，γ-干擾素釋放試驗(Interferon?gamma?release?assay,IGRA)可以作為結核菌素皮試試驗TST的替代方法，被WOAH推薦用于牛結核病的輔助診斷。禽結核病主要依賴禽結核菌素皮試試驗進行檢測。無論是TST還是IFN-γ釋放試驗，都需要使用到牛型結核菌素(PPD-B)和禽型結核菌素(PPD-A)作為檢測/刺激抗原，因此經準確定量的結核菌素制品是牛結核病和禽結核病準確診斷的前提。

PPD-B和PPD-A作為牛結核病和禽結核病的診斷抗原，其診斷準確性與效價定值密切相關。提純菌素在制備過程中受多種因素的影響，傳統的結核菌素效價測定方法是利用經菌素致敏的豚鼠進行皮試試驗，并根據腫脹面積計算菌素效價。效價標定結果與豚鼠品系、個體差異、致敏狀況、腫脹測量誤差等因素相關，導致菌素蛋白含量與效價測定之間存在較大波動，重復性差。實踐中為了克服這些困難，需要進行多次蛋白和效價的測定，計算平均值。該過程費時費力、周期長、費用高。基于上述背景，迫切需要創建結核菌素效價測定新方法，實現PPD-B和PPD-A效價測定的準確快捷。

發明內容

本發明要解決的技術問題在于，提供一種針對豚鼠IFN-γ的單克隆抗體及其用途。

為了解決上述問題，作為本發明的第一方面，本發明提供了一種雜交瘤細胞株GIFN-1A2，豚鼠?IFN-y?單抗雜交瘤細胞株，其于2023年1月5日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏號為CGMCC?No.45344。具體的，本發明的發明人經過深入的研究，利用豚鼠IFN-γ作為免疫源，構建了一種雜交瘤細胞株，該細胞株所分泌的單克隆抗體與IFN-γ的結合特異性強，為采用其進行IFN-γ的測定提供了良好的基礎。進而也為結核菌素效價標定提供了良好的基礎。

作為本發明的第二個方面，本發明提供了一種針對豚鼠IFN-γ的單克隆抗體，其由上述的雜交瘤細胞株GIFN-1A2分泌而得。

作為本發明的第三個方面，本發明提供了上述的單克隆抗體在制備藥物組合物中的用途。

作為本發明的第四個方面，本發明提供了一種藥物組合物，其包括上述的單克隆抗體。

作為本發明的第五個方面，本發明提供了上述的單克隆抗體在制備用于檢測豚鼠IFN-γ的試劑盒中的用途。

作為本發明的第六個方面，本發明提供了上述的單克隆抗體在制備用于結核菌素效價標定的試劑盒中的用途。