[發(fā)明專利]一種外泌體RNA結(jié)合蛋白FUS作為急性缺血性卒中治療靶點(diǎn)的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310087582.0
• 申請(qǐng)日: 2023-04-27
• 公開（公告）號(hào): CN116173214A
• 公開（公告）日: 2023-05-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 逯丹;吳有盛;路愛軍;徐安定;臧健坤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院（廣州華僑醫(yī)院）
• 主分類號(hào): A61K45/00
• 分類號(hào): A61K45/00;A61K33/00;A61P9/10
• 代理公司: 北京智行陽光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11738
• 代理人: 周潔

本發(fā)明公開了靶向FUS的物質(zhì)在制備治療急性缺血性卒中的藥物中的應(yīng)用，所述藥物使FUS在神經(jīng)元外泌體中高表達(dá)。本發(fā)明通過PT腦卒中模型模擬小鼠缺血腦卒中，研究低氧氣體可誘導(dǎo)sEV對(duì)缺血小鼠模型皮層神經(jīng)元的保護(hù)作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)低氧氣體可誘導(dǎo)sEV（HypEV）在神經(jīng)再生中比神經(jīng)元正常氧濃度誘導(dǎo)的sEV（NorEV）對(duì)缺血性腦卒中具有更強(qiáng)的神經(jīng)保護(hù)作用，證明了HypEV與NorEV相比更容易在體外被吸收和利用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，通過調(diào)節(jié)HypEV中RNA運(yùn)輸?shù)年P(guān)鍵RBP—FUS/TLS在HypEV對(duì)神經(jīng)突和神經(jīng)可塑性的保護(hù)作用至關(guān)重要。因此，F(xiàn)US能夠作為治療急性缺血性卒中的靶點(diǎn)，靶向FUS的藥物對(duì)治療急性缺血性卒中具有積極的作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及一種外泌體RNA結(jié)合蛋白FUS作為急性缺血性卒中治療靶點(diǎn)的應(yīng)用。

背景技術(shù)

外泌體（sEV）在結(jié)構(gòu)和功能上是多效的，是天然存在的磷脂雙分子層納米囊泡（直徑約30-150?nm）。幾乎由所有細(xì)胞分泌，并通過運(yùn)輸生物活性物質(zhì)和激活靶細(xì)胞中的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，在細(xì)胞間通信中發(fā)揮重要功能。嚴(yán)重的應(yīng)激會(huì)改變sEV的釋放和含量，導(dǎo)致?lián)p傷或保護(hù)作用。

越來越多的研究表明，缺氧促進(jìn)sEV的分泌，但目前尚不清楚為什么低氧條件下外泌體（HypEV）優(yōu)先被吸收。也尚不清楚為什么sEV會(huì)優(yōu)先針對(duì)神經(jīng)元。間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（MSC-Exos）通過非侵入性計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）在體內(nèi)可視化，顯示MSC-Exos選擇性靶向缺血性中風(fēng)、帕金森病、阿爾茨海默病和自閉癥障礙小鼠模型中受病理影響的大腦區(qū)域和神經(jīng)元。這揭示了MSC-Exosin在體內(nèi)的歸巢現(xiàn)象，這歸因于炎癥。在體外原代神經(jīng)元-星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)模型中，sEV在一定程度上靶向神經(jīng)元，但不靶向星形膠質(zhì)細(xì)胞。然而，允許sEV有效靶向神經(jīng)元的細(xì)胞和分子機(jī)制仍然未知，因此，需要進(jìn)一步的研究來確定這些機(jī)制。

先前的研究表明，sEV載物分子根據(jù)供體細(xì)胞的缺氧嚴(yán)重程度和健康狀態(tài)有很大差異，導(dǎo)致靶細(xì)胞的功能結(jié)果差異極大。sEV可以運(yùn)輸與細(xì)胞損傷相關(guān)的分子或?yàn)榧?xì)胞存活提供關(guān)鍵的營養(yǎng)因子。在編碼RNA和非編碼RNA轉(zhuǎn)運(yùn)過程中，RNA結(jié)合蛋白（RBPs）負(fù)責(zé)將RNA包裝成sEV，并通過RNA-核糖核蛋白（RNP）復(fù)合物促進(jìn)RNA轉(zhuǎn)運(yùn)。此外，RBPs對(duì)于突觸mRNA的轉(zhuǎn)運(yùn)和定位至關(guān)重要，這一關(guān)鍵過程使神經(jīng)元能夠通過快速合成蛋白質(zhì)來應(yīng)對(duì)不同環(huán)境中的刺激。

RBPs可以結(jié)合特定的RNA并選擇性地將其穿梭到sEV中。FUS?（Fused?in?sarcoma）已經(jīng)證明了這種能力。FUS是一種高度保守的蛋白，首次在人脂肪肉瘤中被鑒定為融合癌基因。有證據(jù)證實(shí)FUS是中樞神經(jīng)系統(tǒng)正常發(fā)育和神經(jīng)元存活的重要RBP。FUS突變可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)易患神經(jīng)退行性疾病，如ALS和額顳葉癡呆(FTD)。據(jù)報(bào)道，F(xiàn)US介導(dǎo)核質(zhì)穿梭、剪接、轉(zhuǎn)錄、microRNA加工、RNA運(yùn)輸和翻譯以及應(yīng)激顆粒形成。雖然先前的研究報(bào)道了FUS在細(xì)胞中發(fā)揮關(guān)鍵作用，但很少有研究FUS和FUS結(jié)合mRNA的轉(zhuǎn)運(yùn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提出一種外泌體RNA結(jié)合蛋白FUS作為急性缺血性卒中治療靶點(diǎn)的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的將通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明一方面提供了靶向FUS?（Fused?in?sarcoma）的物質(zhì)在制備治療急性缺血性卒中的藥物中的應(yīng)用，所述藥物使FUS在神經(jīng)元外泌體（HypEV）中高表達(dá)。

進(jìn)一步的，所述高表達(dá)的FUS促進(jìn)HypEV緩解缺血神經(jīng)元損傷。

本發(fā)明另一方面提供了FUS?（Fused?in?sarcoma）在制備治療急性缺血性卒中的藥物中的應(yīng)用，所述藥物使FUS在神經(jīng)元外泌體（HypEV）中高表達(dá)。

進(jìn)一步的，所述高表達(dá)的FUS促進(jìn)HypEV緩解缺血神經(jīng)元損傷。

進(jìn)一步的，所述藥物為所述藥物為N₂?95%和CO₂?5%。