[發明專利]一種脂多糖在特異性誘導細胞產生IL24中的應用

在審

• 申請號: 202310085936.8
• 申請日: 2023-01-18
• 公開（公告）號: CN116287070A
• 公開（公告）日: 2023-06-23
• 發明（設計）人: 謝文強;邵龍泉;廖媛;倪佳
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學口腔醫院
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C07K14/54;C12N5/077;A61K38/20;A61K31/739;A61P35/00
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 祝萍萍

本發明屬于誘導表達技術領域，公開了一種脂多糖在特異性誘導細胞產生IL24中的應用。本發明將脂多糖在特異性誘導細胞產生IL24中應用。本發明發現牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas?gingivalis)的脂多糖(LPS)可以特異性誘導成纖維細胞產生IL24。相較于現有技術中可以誘導細胞產生IL24的IL?1β、IL17A等細胞因子，P.g?LPS獲取更簡單，成本更低。本發明為通過誘導IL24治療腫瘤疾病提供了新的思路。

技術領域

本發明涉及誘導表達技術領域，具體涉及一種脂多糖在特異性誘導細胞產生IL24中的應用。

背景技術

IL24(白細胞介素24)又名黑色素瘤分化相關基因7(mda-7)在抑制腫瘤生長中發揮重要作用。IL24通過以下幾種途徑來起到抑制腫瘤發生的：通過直接途徑誘導腫瘤細胞的凋亡，具體機制包括內源性線粒體途徑：IL24的誘導，引起腫瘤細胞線粒體功能的喪失和膜電位的下降，從而導致了ROS的產生，引起腫瘤細胞凋亡；內質網壓力途徑：在IL24的刺激下，激活了腫瘤細胞保守性蛋白UPR，進而引起了GADD基因的表達，從而導致了腫瘤細胞凋亡的發生。此外，IL24在某些惡性腫瘤中，還可以通過間接途徑抑制腫瘤細胞的侵襲和遷移。這些機制包括縫隙連接、免疫反應、缺血壞死以及凋亡與吞噬等。例如，IL24通過可以激活CD8⁺T細胞，產生遠距離旁觀者效應，來抑制遠處腫瘤細胞的生長。IL24還可以抑制腫瘤血管生成和介導其他免疫學效應等其他途徑抑制腫瘤發生。由于IL24具有以上幾個優點，因此成為了基因治療的首選抗癌基因，具有重要臨床價值。有報道IL24由體內多種細胞產生，然而，關于IL24由何種因素誘導產生目前缺乏研究。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足之處而提供一種脂多糖在特異性誘導細胞產生IL24中的應用。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案如下：

第一方面，本發明將脂多糖在特異性誘導細胞產生IL24中應用。

本發明發現牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas?gingivalis)的脂多糖(LPS)可以特異性誘導成纖維細胞產生IL24。相較于現有技術中可以誘導細胞產生IL24的IL-1β、IL17A等細胞因子，P.g-LPS獲取更簡單，成本更低。

作為本發明所述應用的優選實施方式，所述所述脂多糖提取自牙齦卟啉單胞菌。

進一步的，所述牙齦卟啉單胞菌為牙齦卟啉單胞菌ATCC33277菌株。

進一步的，所述提取方法包括以下步驟：

(1)將所述牙齦卟啉單胞菌復蘇，于厭氧培養箱培養；

(2)使用脂多糖提取試劑盒提取脂多糖；

(3)用70％乙醇及蛋白酶K處理提取的脂多糖，超純水透析，離心，制成凍干粉，即成。

更進一步的，在步驟(1)中，所述復蘇采用腦心浸液培養基；所述培養的條件為80％N₂，10％H₂，10％CO₂，時間為36～48小時。

更進一步的，在步驟(3)中，所述透析采用4℃超純水透析36～48小時。

作為本發明所述應用的優選實施方式，所述細胞為成纖維細胞。

作為本發明所述應用的優選實施方式，所述脂多糖與所述細胞共培養。

進一步的，所述脂多糖的濃度為0.1～10μg/mL。

第二方面，本發明將脂多糖在制備通過特異性誘導細胞產生IL24抑制腫瘤的藥物中的應用。本發明為通過誘導IL24治療腫瘤疾病提供了新的思路。

作為本發明所述應用的優選實施方式，所述脂多糖提取自牙齦卟啉單胞菌。