[發明專利]生物標志物在制備肺癌檢測試劑中的用途和方法

在審

• 申請號: 202310082354.4
• 申請日: 2021-10-09
• 公開（公告）號: CN116381073A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 胡寓旻;姚瑤
• 申請（專利權）人: 中山大學腫瘤防治中心(中山大學附屬腫瘤醫院;中山大學腫瘤研究所)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 杭州天昊專利代理事務所(特殊普通合伙) 33283
• 代理人: 向慶寧;曹小燕

本發明涉及醫學診斷領域，具體的說是利用血清代謝組學篩選出用于肺癌檢測的生物標志物。本發明提供了鑒別診斷肺癌和健康人、肺癌和肺部良性肺結節病人的生物標志物，并根據性別差異提供了用于男性或女性的鑒別診斷肺癌和健康人、肺癌和肺部良性肺結節病人的生物標志物。尤其是在肺部有結節病人是否患有肺癌的鑒別診斷上，本發明提供的生物標志物具有重要意義。

本申請主張中國在先申請，申請號：2020110770183，申請日為2020年10月10日的優先權，該申請的所有內容作為本申請的一部分；本申請為母案2021111749644的分案申請。

技術領域

本發明涉及醫學診斷領域，具體的說是利用血清代謝組學篩選生物標志物對肺癌進行診斷，尤其是良性肺結節和肺癌的鑒別診斷。

背景技術

目前，肺癌的確診主要依賴于有創性的穿刺術以及支氣管鏡檢查取得組織或細胞進行病理檢查。而CT影像學檢查則是主要的輔助診斷手段，而對于肺內小結節良性或者惡性病變的鑒別診斷，仍存在一定挑戰。肺癌血清學檢查，如癌胚抗原、角蛋白片段、鱗狀上皮細胞癌抗原等可作為肺癌的輔助診斷或隨訪監測，但目前靈敏度和特異度仍待提高。

近年來，隨著質譜技術的高速發展，代謝組學(Metabolomics)在疾病診斷中的應用研究也逐漸被廣泛關注。代謝組學是對機體中相對分子量小于1,000的小分子代謝產物進行定性和定量分析的一門新學科。代謝組(Metabolome)是指某一生物或細胞在特定生理時期內所有的低分子量代謝產物，而細胞內許多生命活動是發生在代謝物層面的。因此，代謝組的檢測與鑒定，可以判斷機體的病理生理狀態，并有可能找出與之發病機制相關的標志物。由此可見，代謝組學在臨床醫學領域具有廣泛的應用前景。血清中的代謝物是穩定的并且可以量化的，這為臨床應用提供了一種無創診斷的可能性。

目前，臨床上還沒有可用于診斷肺癌或者用于鑒別診斷肺部腫瘤與良性結節的代謝標志物，而對于顯示肺部結節的病人是否就是肺癌患者的鑒別診斷在臨床上具有重要意義。

同時，值得關注的是，男女性患者在部分腫瘤(包括肺癌)中的發病、病因、診斷、病理、分子生物學、治療、預后方面均有其各自特點，而現有技術未按性別對腫瘤(包括肺癌)血清代謝標志物進行區分。

這就需要對傳統的技術進行改進，希望能夠擁有診斷或者預測肺癌的方法和試劑。

發明內容

本發明通過采集健康人、良性肺結節病人、肺癌(肺部惡性腫瘤)病人血清樣本，利用液相色譜-高分辨質譜聯用(LC-HRMS)，對以上三類樣本進行了代謝組學分析與代謝譜圖(profiling)的分型，篩選出健康人、良性肺結節病人、肺癌病人之間的生物標志物，并進一步按性別區分，找到同一性別的健康人、肺癌病人及良性肺結節病人之間的生物標志物。

本發明的目的：尋找健康人與肺癌病人之間、良性肺結節病人與肺癌病人之間的代謝生物標志物，以用于肺癌的診斷，特別是用于早期鑒別診斷有結節病人是否患有肺癌。此外，考慮到性別差異的影響，本發明按性別進行了區分，尋找針對男性或女性的用于肺癌診斷的生物標志物。

本發明一方面是提供一種方法，該方法基于血清代謝組學對肺癌生物標志物進行篩選，具體步驟如下：

(1)收集肺癌、良性肺結節和健康人血清樣本；

(2)提取血清代謝物；

(3)采用液相-質譜聯用對提取的血清代謝物進行檢測及數據預處理；

(4)利用偏最小二乘判別分析對樣本分群，結合顯著性分析，篩選不同分組的差異代謝物或者差異的生物標志物；

(5)根據篩選得到的差異代謝物，挖掘肺癌的生物標志物以及這些標志物的應用，例如：如何利用這些標記物來診斷或者預測肺癌患者，或者從健康人群或者結節人群中鑒別診斷出肺癌患者。