[發明專利]一種靶向ALK融合蛋白的放射性多肽68Ga-DOTA-PG01及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202310067357.0
• 申請日: 2023-02-06
• 公開（公告）號: CN116041432A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 高峰;陳國中;陳秀竹
• 申請（專利權）人: 南京硼高生物科技有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/13;C07K1/08;C07K1/06;C07K1/04;A61K51/08;A61K103/00
• 代理公司: 南京九致知識產權代理事務所(普通合伙) 32307
• 代理人: 王曉青

本發明提供的靶向ALK融合蛋白的放射性多肽supgt;68/supgt;Ga?DOTA?PG01及其制備方法與應用，涉及生物醫學領域；放射性多肽supgt;68/supgt;Ga?DOTA?PG01制備時，先通過生物偶聯技術將環狀多肽PG01N端的氨基與偶聯劑DOTA?NHS進行縮合反應，得到多肽偶聯物DOTA?PG01，多肽偶聯物DOTA?PG01中的螯合劑DOTA與supgt;68/supgt;Ga螯合，構建靶向ALK融合蛋白的放射性多肽supgt;68/supgt;Ga?DOTA?PG01；本發明首次合成了靶向ALK融合蛋白的多肽DOTA?PG01，通過supgt;68/supgt;Ga標記構建了靶向ALK融合蛋白的放射性多肽supgt;68/supgt;Ga?DOTA?PG01，能作為示蹤劑用于ALK陽性腫瘤的活體顯像，提出ALK融合基因陽性患者篩查及病理信息獲取新方法。

技術領域

本發明涉及生物醫學技術領域，具體涉及一種靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01及其制備方法與應用。

背景技術

我國癌癥發病率、死亡率全球第一。基于基因的靶向治療是目前腫瘤治療最精準的方法，而開展靶向治療的前提是篩選出特定基因陽性的人群。

間變性淋巴瘤激酶(ALK)是胰島素受體家族的一種受體酪氨酸激酶，正常情況下只表達于神經系統，它與多種腫瘤的發生有著密切的聯系。ALK蛋白的N端位于細胞膜外，C端位于胞內；胞外是受體區，胞內是激酶區。胞內的激酶區是ALK發揮激酶功能的主要結構域，可激活多個細胞內信號通路，包括JAK-STAT、PI3K-AKT、mTOR及MAPK等信號通路，從而參與調節細胞生長、轉化及抗細胞凋亡。在多種腫瘤中ALK的胞內激酶區發生重組、突變或擴增，引起下游信號通路的激活，導致癌細胞的增殖、生長和侵襲。

融合突變是ALK最常見的基因異位，在多種腫瘤中均發現ALK融合突變，如NSCLC患者中有3-7％發現ALK-EML4融合蛋白；在其他腫瘤如神經母細胞瘤、乳腺浸潤性導管癌等腫瘤中，ALK融合已被證實為腫瘤發生的驅動基因。ALK融合基因已經成為多種腫瘤的特異性靶點。

目前檢測ALK融合基因表達主要通過活檢或組織學檢測，但均存在一定局限性，如：有創性、不可能每個組織都能取得到樣本、不能反應病變全貌等；因此，開發特異性靶向ALK融合蛋白的新型核素藥物，發展無創、快速、精準檢測基因的影像學方法，用于ALK陽性患者“伴隨診斷”、獲得活體分子病理信息，實現ALK陽性腫瘤的“精準制導”，具有重大的臨床價值。

發明內容

本發明目的在于提供一種靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01及其制備方法與應用，公開一種靶向ALK融合蛋白的核素探針，實現基于核素探針的無創快速核醫學影像檢測ALK融合蛋白，解決當前主要通過活檢或組織學檢測ALK融合蛋白基因表達方法存在的局限性。

為達成上述目的，本發明提出如下技術方案：一種靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01。通過生物偶聯技術將環狀多肽PG01?N端的氨基與偶聯劑DOTA-NHS進行縮合反應，得到多肽偶聯物DOTA-PG01；所述多肽偶聯物DOTA-PG01中的螯合劑DOTA與⁶⁸Ga螯合，構建靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01；

所述放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的結構式如下所示：

所述靶向ALK融合蛋白的放射性多肽⁶⁸Ga-DOTA-PG01的氨基酸序列為：

Phe-cyclo(Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys)-Thr，

其中，環狀結構由Cys-D-Trp-Thr-Lys-Tyr-Cys通過兩個半胱氨酸之間形成二硫鍵成環。