[發(fā)明專利]一種層出鐮孢菌（Fusarium proliferatum）APF-1菌株及其應(yīng)用和分離方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310065359.6
• 申請日: 2023-02-06
• 公開（公告）號: CN116376710A
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭超;林巧玲;朱瑞基;韓曉妍;李慧儀;劉金波;劉月廉
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東海洋大學(xué)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;A01N63/30;A01P13/02;C12R1/77
• 代理公司: 廣州市南鋒專利事務(wù)所有限公司 44228
• 代理人: 李慧

1.一種層出鐮孢菌(Fusarium?proliferatum)APF-1，保藏編號為CGMCC?40442，2022年12月29日保藏于中國微生菌種保藏管理委員會普通微生物中心。

2.一種如權(quán)利要求1所述的層出鐮孢菌(Fusarium?proliferatum)APF-1在生物除草劑中的應(yīng)用。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述除草劑的作用對象包括喜旱蓮子草，可致作物中生長的喜旱蓮子草黃化腐爛。

4.一種如權(quán)利要求1所述的層出鐮孢菌(Fusarium?proliferatum)APF-1的分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)發(fā)病樣本采集：從喜旱蓮子草生長田間采集發(fā)病樣本，備用；

(2)病樣的表面消毒：將發(fā)病樣本的病葉剪成約5mm×5mm的小塊，經(jīng)75％酒精消毒4s、2％次氯酸鈉5min后，用無菌水沖洗3次，置于無菌干燥濾紙上自然晾干；

(3)菌落的培養(yǎng)：將小塊置于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)平板上，28℃黑暗培養(yǎng)48h；

(4)菌絲的純化：挑取小塊上生長的菌絲末端一小塊移入新鮮PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得純培養(yǎng)物；

(5)單孢分離：在上述培養(yǎng)3d的純培養(yǎng)物中加入10mL無菌水，用無菌涂布器將孢子洗下，無菌濾布過濾，無菌水調(diào)節(jié)孢子濃度為1×10⁵個/mL孢子懸液，取100μL涂布于PDA平板上，培養(yǎng)24h，可見單菌落，將單菌落菌絲末端一小塊移入新鮮PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得單孢分離物APF-1菌株。

5.如權(quán)利要求4所述的層出鐮孢菌(Fusarium?proliferatum)APF-1的分離方法，其特征在于，所述菌株APF-1保存方法為：將菌落在-80℃的甘油中保存。