[發(fā)明專(zhuān)利]芹菜素在制備拮抗上皮細(xì)胞凋亡藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310060866.0
• 申請(qǐng)日: 2023-01-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN115813908A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-03-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 董競(jìng)成;羅清莉;余杭;黃嘻
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): A61K31/352
• 分類(lèi)號(hào): A61K31/352;A61P11/06
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11385
• 代理人: 戴嵩瑋

本發(fā)明涉及藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及芹菜素在制備拮抗上皮細(xì)胞凋亡藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)液相質(zhì)譜技術(shù)，發(fā)現(xiàn)芹菜素是羅歐咳祖帕發(fā)揮抗哮喘作用的藥效物質(zhì)之一，采用芹菜素進(jìn)行體內(nèi)和體外干預(yù)小鼠慢性哮喘和人氣道上皮細(xì)胞(HBE)凋亡實(shí)驗(yàn)。體外結(jié)果顯示，芹菜素能抑制HBE的凋亡水平、下調(diào)線(xiàn)粒體膜電位及相關(guān)凋亡蛋白；體內(nèi)結(jié)果顯示，芹菜素能降低卵蛋白(OVA)致敏小鼠的氣道上皮細(xì)胞凋亡、下調(diào)線(xiàn)粒體相關(guān)凋亡蛋白。結(jié)果表明，芹菜素可以抑制氣道上皮細(xì)胞凋亡，特別是抑制線(xiàn)粒體介導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞凋亡，進(jìn)而在體內(nèi)顯示抗哮喘氣道重構(gòu)的作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及芹菜素在制備拮抗上皮細(xì)胞凋亡藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前，有相當(dāng)多的文獻(xiàn)報(bào)道上皮細(xì)胞凋亡可能在哮喘患者發(fā)病及氣道重塑中起到一定的作用。其發(fā)揮作用可能通過(guò)JNK、ERK和p38 MAPK三種經(jīng)典途徑。JNK和p38 MAPK在細(xì)胞暴露于各種物理、化學(xué)和生物應(yīng)激刺激引起的應(yīng)激后被明顯地激活，被激活的JNK和p38MAPK在細(xì)胞生存和死亡中發(fā)揮關(guān)鍵作用。目前，大量的文獻(xiàn)支持JNK和p38 MAPK介導(dǎo)促凋亡過(guò)程，許多Bcl-2家族蛋白在轉(zhuǎn)錄水平或轉(zhuǎn)錄后水平接受其調(diào)節(jié)。Bcl-2家族蛋白改變線(xiàn)粒體外膜的通透性并釋放細(xì)胞色素c，這是內(nèi)在凋亡途徑的關(guān)鍵步驟之一。細(xì)胞色素c的釋放誘發(fā)了caspase-9的激活，隨后是caspase-3的激活，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。值得注意的是，caspase-9和隨后的caspase-3的激活導(dǎo)致Bcl-2蛋白水解，從而促進(jìn)更多細(xì)胞色素c的釋放和caspase-9/3的激活，形成一個(gè)正反饋，進(jìn)一步誘發(fā)細(xì)胞凋亡。

但是現(xiàn)有研究中無(wú)法科學(xué)的確認(rèn)羅歐咳祖帕中發(fā)揮抗哮喘作用的藥效物質(zhì)，其抗哮喘的機(jī)制也需要深入的探索。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了芹菜素在制備拮抗上皮細(xì)胞凋亡藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)芹菜素是羅歐咳祖帕發(fā)揮抗哮喘作用的藥效物質(zhì)之一，芹菜素通過(guò)MAPK(JNK、ERK和p38 MAPK)和氣道上皮細(xì)胞凋亡途徑發(fā)揮抗哮喘作用。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了芹菜素在制備拮抗上皮細(xì)胞凋亡藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選的，所述上皮細(xì)胞凋亡包括線(xiàn)粒體介導(dǎo)的上皮細(xì)胞凋亡。

優(yōu)選的，所述上皮細(xì)胞包括氣道上皮細(xì)胞。

本發(fā)明提供了芹菜素在制備防治哮喘藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選的，所述哮喘包括慢性哮喘。

優(yōu)選的，所述慢性哮喘包括哮喘氣道重構(gòu)。

有益效果：

本發(fā)明提供了芹菜素在制備拮抗上皮細(xì)胞凋亡藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)液相質(zhì)譜技術(shù)，發(fā)現(xiàn)芹菜素是羅歐咳祖帕發(fā)揮抗哮喘作用的藥效物質(zhì)之一(見(jiàn)圖17和圖18)，采用芹菜素進(jìn)行體內(nèi)和體外干預(yù)小鼠慢性哮喘和人氣道上皮細(xì)胞(HBE)凋亡實(shí)驗(yàn)。體外結(jié)果顯示，芹菜素能抑制HBE的凋亡水平、下調(diào)線(xiàn)粒體膜電位及相關(guān)凋亡蛋白；體內(nèi)結(jié)果顯示，芹菜素能降低卵蛋白(OVA)致敏小鼠的氣道上皮細(xì)胞凋亡、下調(diào)線(xiàn)粒體相關(guān)凋亡蛋白。結(jié)果表明，芹菜素可以抑制氣道上皮細(xì)胞凋亡，特別是抑制線(xiàn)粒體介導(dǎo)的氣道上皮細(xì)胞凋亡，進(jìn)而在體內(nèi)顯示抗哮喘氣道重構(gòu)的作用。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹。

圖1為人氣道上皮細(xì)胞(HBE)凋亡的流式檢測(cè)結(jié)果；

圖2為不同組細(xì)胞凋亡率計(jì)算結(jié)果；

圖3為活細(xì)胞工作站下觀(guān)察線(xiàn)粒體膜電位結(jié)果；

圖4為線(xiàn)粒體質(zhì)量分析的流式分析結(jié)果；

圖5為相關(guān)凋亡蛋白的檢測(cè)結(jié)果；