[發明專利]一種原代上皮細胞的培養體系和應用

在審

• 申請號: 202310060352.5
• 申請日: 2023-01-16
• 公開（公告）號: CN116083342A
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 汪悅;李躍兵
• 申請（專利權）人: 細新（上海）醫療科技有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12Q1/02
• 代理公司: 上海恒慧知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 31317
• 代理人: 徐紅銀;禹雪平

1.一種原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，按重量百分比計，所述培養體系包括：基礎培養基81.5-97.5％、胎牛血清小于2％且不小于0.5％、抗生素1-5％和添加劑0.5-2％，所述添加劑包括多種生長因子。

2.根據權利要求1所述的原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，所述基礎培養基包括氨基酸、維生素、鹽類、脂類、微量元素、嘌呤、嘧啶、緩沖液和pH指示劑。

3.根據權利要求1所述的原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，所述添加劑為在4℃保存時容易分解的物質，所述添加劑以工作濃度100倍的濃度配置成溶液在-20℃長期保存，使用時按百分之一的量添加至所述基礎培養基中。

4.根據權利要求1所述的原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，所述多種生長因子包括重組人表皮細胞生長因子、重組人胰島素、人全鐵轉鐵蛋白、三碘甲狀腺氨酸和牛腦垂體提取物。

5.根據權利要求4所述的原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，所述添加劑還包括腺嘌呤和氫化可的松。

6.根據權利要求5所述的原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，所述添加劑中各組分在培養體系中的濃度為：重組人表皮細胞生長因子15-25ng/ml、氫化可的松300-600ng/ml、三碘甲狀腺氨酸4-8pg/ml、腺嘌呤18-25ug/ml、重組人胰島素5-10ug/ml、人全鐵轉鐵蛋白5-10ug/ml、牛腦垂體提取物濃度為0.25-0.4％。

7.根據權利要求1所述的原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，所述抗生素包括青霉素和鏈霉素。

8.根據權利要求7所述的原代上皮細胞的培養體系，其特征在于，青霉素和鏈霉素以工作濃度100倍的濃度配置成溶液在-20℃長期保存，使用時按百分之一的量添加至所述基礎培養基中。

9.一種權利要求1-8任一項所述的培養體系在培養上皮細胞中的應用。

10.一種權利要求1-8任一項所述的培養體系在腸上皮屏障功能實驗中的應用。