[發(fā)明專利]一種免洗均相檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310055874.6
• 申請日: 2023-01-19
• 公開（公告）號: CN116338171A
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發(fā)明（設計）人: 章鋼剛;鄧省亮;賴曉翠;蘇柳;賀偉華;賴衛(wèi)華;張干
• 申請（專利權）人: 江西省科學院微生物研究所（江西省流域生態(tài)研究所）
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/531;G01N21/64
• 代理公司: 南昌大牛知識產權代理事務所(普通合伙) 36135
• 代理人: 劉俊文

1.一種免洗均相檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將待測樣本溶液加入至包含ZnO免疫探針和免疫磁珠的溶液中，孵育后磁分離，棄上清，加水分散沉淀；

(2)加入HNO₃溶液進行消解，隨后調節(jié)pH為中性后加入含羧基的AIE染料溶液，通過記錄熒光信號強度計算待測樣本溶液中待檢物的濃度；

ZnO免疫探針由納米ZnO偶聯(lián)待檢物抗體得到；免疫磁珠由超順磁鐵氧體偶聯(lián)待檢物抗體得到。

2.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，ZnO免疫探針通過以下過程制得：將納米ZnO加入至硼酸鹽緩沖溶液中，然后加入待檢物抗體進行標記，隨后加入酪蛋白溶液進行封閉，最后離心，下層沉淀即為ZnO免疫探針。

3.根據(jù)權利要求2所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，標記時間為2h；封閉時間為1h。

4.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，納米ZnO的粒徑為0.05μm-10μm，形貌為納米花、納米球或納米棒。

5.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，ZnO免疫探針中，抗體偶聯(lián)量為4μg/mg-200μg/mg。

6.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，免疫磁珠的粒徑為0.1μm-5μm。

7.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，含羧基的AIE染料為四苯乙烯類、噻咯類或三苯胺類。

8.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，待檢物為細胞、細菌或蛋白質。

9.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，孵育時間為10min，磁分離時間為3min，消解時間為1min。

10.根據(jù)權利要求1所述的免洗均相檢測方法，其特征在于，包含ZnO免疫探針和免疫磁珠的溶液由以下過程得到：將ZnO免疫探針分散于PBS溶液中得到ZnO免疫探針溶液，Zn?O免疫探針的濃度為0.5mg/mL-5mg/mL，將免疫磁珠分散于PBS溶液中得到免疫磁珠溶液，隨后將ZnO免疫探針溶液和免疫磁珠溶液混勻；步驟(2)中，HNO₃溶液的濃度為0.1M-2M，含羧基的AIE染料溶液的濃度為0.1mM-10mM；ZnO免疫探針溶液、HNO₃溶液和含羧基的AIE染料溶液的體積比為(1μL-10μL)：(2μL-20μL)：(1μL-10μL)。