[發(fā)明專利]一種熱損傷致神經(jīng)病理性疼痛動物模型的構(gòu)建方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310054205.7
• 申請日: 2023-02-03
• 公開（公告）號: CN115943925A
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任占杰;劉彥朋;于志軍;黃科昌;翟永吉;王若國
• 申請（專利權(quán)）人: 濰坊醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 山東華君知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37300
• 代理人: 武歡歡

本發(fā)明提供一種熱損傷致神經(jīng)病理性疼痛動物模型的構(gòu)建方法，所述構(gòu)建方法為對成年雄性SD大鼠坐骨神經(jīng)進(jìn)行射頻熱凝處理；所述射頻熱凝處理的方法為雙極射頻模式，位置為大鼠坐骨神經(jīng)分叉向頭端方向0.5cm處和1cm處，射頻參數(shù)如下：溫度65℃，脈率2Hz、脈寬20ms，持續(xù)時間為1min，進(jìn)行兩次射頻熱凝處理，間隔5分鐘。本發(fā)明構(gòu)建得到熱損傷致神經(jīng)病理性疼痛動物模型，對機(jī)械性痛刺激反應(yīng)敏感性和對熱痛刺激的敏感性均提高，光鏡見坐骨神經(jīng)損傷，背根神經(jīng)節(jié)見Nav1.8mRNA表達(dá)增加，射頻熱凝處理后的一序列變化符合神經(jīng)病理性疼痛的特征。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種熱損傷致神經(jīng)病理性疼痛動物模型的構(gòu)建方法，屬于動物模型構(gòu)建技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

神經(jīng)病理性疼痛是由軀體感覺神經(jīng)系統(tǒng)的損傷或疾病引起的疼痛，自發(fā)性疼痛及痛覺超敏是其主要臨床特征，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，有多種病理生理學(xué)特征。

現(xiàn)有技術(shù)中通過物理和化學(xué)因素造成神經(jīng)損傷，進(jìn)而模擬臨床各種原因?qū)е碌纳窠?jīng)病理性疼痛。比如通過坐骨神經(jīng)慢性卡壓或結(jié)扎等方法，模擬物理因素及炎癥因素建立外周神經(jīng)損傷的神經(jīng)病理性疼痛動物模型，其卡壓的松緊程度、力度等控制只能通過人為觀察進(jìn)行判斷，存在一定的人為誤差，難以均衡，不能完全確保損傷程度的一致性。化學(xué)因素造成神經(jīng)損傷的情形包括通過高血糖對神經(jīng)損傷建立糖尿病周圍神經(jīng)病變的病理性疼痛動物模型。

由于引起神經(jīng)病理性疼痛的原因不同，盡管其臨床表現(xiàn)相似，但其發(fā)病機(jī)制及治療策略存在明顯差異。當(dāng)前，隨著熱效應(yīng)臨床治療方式的廣泛應(yīng)用，隨之產(chǎn)生的相關(guān)治療后神經(jīng)病理性疼痛的情況也隨之增多。常見的熱效應(yīng)治療方式包括微波消融術(shù)，射頻消融術(shù)，經(jīng)皮激光消融術(shù)，高強(qiáng)度聚焦超聲，其工作機(jī)理均是通過不同的能量方式產(chǎn)生局部熱效應(yīng)作用于靶組織，通過高溫作用使組織凝固壞死達(dá)到滅活細(xì)胞和組織的目的。由于治療靶點(diǎn)與神經(jīng)的密切關(guān)系及手術(shù)操作相關(guān)的問題，術(shù)后神經(jīng)損傷引起的疼痛的發(fā)生難以避免。

盡管熱損傷后神經(jīng)痛存在，但少見神經(jīng)熱損傷后修復(fù)及治療相關(guān)研究，其根本原因在于缺乏神經(jīng)熱損傷相關(guān)臨床模型。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供一種熱損傷致神經(jīng)病理性疼痛動物模型的構(gòu)建方法，實(shí)現(xiàn)以下發(fā)明目的：構(gòu)建一種熱損傷致神經(jīng)病理性疼痛動物模型，處理后5天形成機(jī)械性刺激神經(jīng)痛，處理后7天形成熱刺激神經(jīng)痛，且神經(jīng)痛的持續(xù)時間長。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：

一種熱損傷致神經(jīng)病理性疼痛動物模型的構(gòu)建方法，對成年雄性SD大鼠進(jìn)行射頻熱凝處理；所述射頻熱凝處理的方法為采用雙極射頻模式，射頻溫度為65℃，脈率2Hz、脈寬20ms，持續(xù)時間為?1min，進(jìn)行兩次射頻熱凝處理，間隔5分鐘。射頻位置為大鼠坐骨神經(jīng)分叉向頭端方向0.5cm處和1cm處。

射頻熱凝針接觸坐骨神經(jīng)后，出現(xiàn)足部抽動，表明到達(dá)預(yù)設(shè)位置。

射頻熱凝處理之前通過超聲定位大鼠坐骨神經(jīng)分叉處向頭端方向0.5cm處和1cm處的位置和深度，并在皮膚上做好標(biāo)記。

在進(jìn)行射頻熱凝之前對大鼠飼養(yǎng)5天；所述飼養(yǎng)方法為選取成年雄性SD大鼠，動物房及實(shí)驗(yàn)室的溫度控制為23-26℃，相對濕度控制為40-60%，保證動物的生物節(jié)律，實(shí)行12小時的光照/黑暗循環(huán)環(huán)境設(shè)定，并自由提供食物和水；動物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)均在白天進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)前3天每天將大鼠置于觀察箱中適應(yīng)30分鐘。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明取得以下有益效果：

（1）本申請通過射頻熱凝技術(shù)創(chuàng)建了一種穩(wěn)定的熱損傷后病理性神經(jīng)疼痛的動物模型，可以應(yīng)用于熱損傷后神經(jīng)修復(fù)和后續(xù)臨床治療研究。