[發明專利]亞胺還原酶及其制備方法和編碼亞胺還原酶的DNA在審
| 申請號： | 202310047659.1 | 申請日： | 2023-01-31 |
| 公開（公告）號： | CN116218803A | 公開（公告）日： | 2023-06-06 |
| 發明（設計）人： | 高靜;劉茜琳;姜艷軍;李春柳;王立暉;宋浩雷;李霆;賀瑩;周麗亞;劉運亭 | 申請（專利權）人： | 河北工業大學 |
| 主分類號： | C12N9/06 | 分類號： | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12P17/16;C12R1/19 |
| 代理公司： | 石家莊旭昌知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 13126 | 代理人： | 張會強 |
| 地址： | 300130 天津市*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 亞胺 還原酶 及其 制備 方法 編碼 dna | ||
1.一種亞胺還原酶，其特征在于，所述亞胺還原酶的氨基酸序列為：SEQ?IDNO.1。
2.一種編碼權利要求1所述的亞胺還原酶的DNA，其特征在于，所述DNA的核苷酸序列為：SEQ?ID?NO.2。
3.一種權利要求1所述的亞胺還原酶的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
活化菌株：將負載有SEQ?ID?NO.2基因的基因工程菌接種至LB培養基中，控制搖床溫度35-38℃，轉速150-200rpm，培養12-16h，獲得種子液；
制備粗酶液：將所述種子液接種至TB培養基中，控制搖床溫度35-38℃，轉速150-200rpm，培養菌液2.5-3.5h，當OD600值為0.6-0.8時添加誘導劑，控制搖床溫度18-25℃，轉速150-200rpm，發酵培養20-23h，然后離心分離，收集沉淀，高壓破碎，獲得所述亞胺還原酶。
4.一種如權利要求3所述的亞胺還原酶的制備方法，其特征在于，所述基因工程菌的構建方法包括以下步驟：
以SEQ?ID?NO.2的基因為目的基因，以質粒pET28a(+)為表達載體，將所述目的基因插入所述表達載體中獲得重組質粒，將所述重組質粒導入宿主菌株中，得到所述基因工程菌。
5.一種如權利要求4所述的亞胺還原酶的制備方法，其特征在于：所述宿主菌株為大腸桿菌BL21(DE3)。
6.一種如權利要求4所述的亞胺還原酶的制備方法，其特征在于：將所述目的基因插入所述表達載體時，選取的酶切位點是NdeI酶切位點和/或EcoRI酶切位點。
7.一種根據權利要求1所述的亞胺還原酶催化麥斯明制備(S)-降煙堿反應中的應用。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于河北工業大學，未經河北工業大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202310047659.1/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
