[發明專利]一種同時檢測六種念珠菌的實時熒光核酸恒溫擴增檢測試劑盒及其專用引物和探針

在審

• 申請號: 202310045595.1
• 申請日: 2023-01-30
• 公開（公告）號: CN116042902A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 居金良;崔振玲;錢衛國;沈曉寧
• 申請（專利權）人: 上海仁度生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11;C12Q1/6893;C12Q1/6844;C12R1/725;C12R1/74;C12R1/72;C12R1/90
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 葉占洋;魯兵

本發明公開一種同時檢測六種念珠菌的實時熒光核酸恒溫擴增檢測試劑盒及其專用引物和探針，進一步地還提供一種同時檢測六種念珠菌和陰道毛滴蟲的實時熒光核酸恒溫擴增檢測試劑盒及其專用引物和探針，屬于生物醫學檢測技術領域。本發明提供的試劑盒包括針對六種念珠菌、或進一步針對陰道毛滴蟲的核酸提取液、檢測液和SAT酶液，通過優化設計更適合于以上這些微生物檢測的引物和探針，并在檢測過程中分步添加各組分進行分步反應可以實現對六種念珠菌、或六種念珠菌聯合陰道毛滴蟲的實時、快速檢測，并且靈敏度高、特異性好，擴增產物RNA易降解不會引起環境污染，且在檢測過程中不會引起樣本交叉污染。

技術領域

本發明屬于生物醫學檢測技術領域，具體涉及一種同時檢測六種念珠菌的實時熒光核酸恒溫擴增檢測試劑盒及其專用引物和探針，還涉及一種同時檢測六種念珠菌和陰道毛滴蟲的實時熒光核酸恒溫擴增檢測試劑盒及其專用引物和探針，特別是涉及使用特異性靶標捕獲技術和實時熒光核酸恒溫擴增檢測技術(Simultaneous?Amplification?andTest，SAT)結合的念珠菌和陰道毛滴蟲的實時熒光核酸恒溫擴增檢測中使用的引物、探針及相關試劑盒。

背景技術

陰道炎(Vaginitis)即陰道炎癥，是導致外陰陰道癥狀如瘙癢、灼痛、刺激和異常流液的一組病癥。臨床上常見有：細菌性陰道病(占有癥狀女性22％～50％)、念珠菌性陰道炎(17％～39％)、滴蟲性陰道炎(4％～35％)、老年性陰道炎、幼女性陰道炎。

念珠菌性陰道炎是由念珠菌(又稱假絲酵母，VVC)屬真菌感染所致，在念珠菌屬中，白色念珠菌(Candida?albicans)是最常見的致病菌，約占85％～95％。而在非白色念珠菌引起的感染中，光滑念珠菌(Candida?glabrata)和熱帶念珠菌(Candida?tropicalis)是最常見的，另外還有如克柔念珠菌(Candida?krusei)、近平滑念珠菌(Candidaparapsilosis)和都柏林念珠菌(canada?dubliniemis)等，主要發生于免疫受損的女性中。尤其是近年來，隨著抗生素等的廣泛應用，念珠菌性陰道炎對病原菌菌譜發生改變，非白色念珠菌引起的念珠菌性陰道炎的病例逐漸增多，且對傳統的治療法具有耐藥性，其中屬光滑念珠菌和克柔念珠菌耐藥性占比最多。因此對念珠菌，尤其是對念球菌中的光滑念珠菌、克柔念珠菌等進行針對性檢測具有重要的流行病學和臨床治療意義。

滴蟲性陰道炎是由陰道毛滴蟲(Trichomonas?vaginalis，TV)感染所致，毛滴蟲是一種寄生蟲，但是肉眼看不見，這種毛滴蟲呈廣梨形或橢圓形，長為10～30μm，寬10～20μm，頭部有4根與蟲體等長的鞭毛，在顯微鏡下可以清楚地看到這種毛滴蟲。TV遍及世界各地，據估計，全世界每年婦女感染人數為1.8億。因此，對陰道毛滴蟲進行針對性檢測也具有重要的流行病學和臨床治療意義。