[發明專利]一種基于表面增強拉曼光譜快速檢測四種興奮劑的方法

在審

• 申請號: 202310039093.8
• 申請日: 2023-01-13
• 公開（公告）號: CN116087170A
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 李劍鋒;馮笛;許珊珊;張月皎
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 游學明

本發明公開了一種基于表面增強拉曼光譜快速檢測四種興奮劑的方法，具體包括下步驟：(1)特征峰的指認及增強基底的篩選、(2)標準品SERS譜圖采集、(3)實際樣SERS譜圖采集。本發明通過液?液萃取唾液和尿液中的興奮劑，取有機層與納米粒子混合后添加團聚劑再次混合，最后進行SERS檢測。得到興奮劑的SERS信號，實現了對體育運動中常使用的興奮劑的超靈敏檢測；本發明提供的方法操作簡單、成本低、檢測速度快，可在60s左右完成、無需大型精密儀器、儀器后期維護簡單、不需要專業技術人員操作，極大的節約了時間和成本。

技術領域

本發明屬于藥物快速檢測技術領域，具體涉及一種基于表面增強拉曼光譜快速檢測四種興奮劑的方法。

背景技術

當今體育賽事已成為國家發展與交流的一個重要方式，但是興奮劑的濫用導致體育比賽失去了它原本的意義，服用興奮劑不僅是對公平的蔑視，也會對運動員造成身體和心理上的傷害，另外，服用興奮劑也有損國家形象，在一定程度上也會對國際交流和發展局勢造成一定的影響。因此，分析檢測興奮劑對國家發展以及對運動動員的身心健康等具有重大的意義。

目前，對于興奮劑檢測分析來說，主要的檢測方法是色譜、質譜或色譜-質譜聯用、為主，以及紫外可見光譜、化學發光免疫分析法等。這些方法各有其優點，但是也存在儀器笨重、昂貴、前處理復雜、需要訓練有素的技術人員進行操作等缺點，如色譜-質譜聯用是通過將待測物各組分先分離，再通過質譜強大的組分鑒別能力確定其是何種物質。另外，興奮劑檢測主要是血檢和尿檢，檢測程序復雜，檢測周期很長，賽前和賽后都要對運動員取樣，不能實現對興奮劑簡單、快速的檢測。因此，為了滿足快速檢測和監管的需要，建立一種檢測速度快、取樣簡單、檢測成本低的方法就尤為重要。

在印度物理學家Raman發現拉曼散射后，經過將近一個世紀的發展，其中表面增強拉曼光譜(SERS)技術隨著激光技術、計算機科學以及納米科學等的發展，其高表面靈敏性，無需樣品預處理、操作簡便、檢測速度快、準確率高、儀器便攜等特點，SERS檢測在食品安全、公共安全、國防安全等領域起到了積極的作用，例如，SERS可以定性、定量檢測有害非法添加物(如三聚氰胺、蘇丹紅等)、超量超范圍使用的添加劑(如食品中的合成色素等)、果蔬中的農藥殘留以及食物表面上的細菌和病毒等，顯然，SERS有望成為一種常用的公共安全現場快速分析方法。目前，有關SERS技術檢測興奮劑的方法也有報道，但是這些方法不能快速現場檢測，并且樣品預處理復雜，雖然彌補了色譜-質譜聯用等方法的一些不足，但要在實際應用還需要開發一種快速、準確、低成本的檢測方法。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術存在的缺陷，提供一種基于表面增強拉曼光譜快速檢測四種興奮劑的方法，通過液-液萃取唾液和尿液中的興奮劑，取有機層與納米溶膠混合后添加團聚劑再次混合，最后進行SERS檢測。

為了實現以上目的，本發明的技術方案之一為：一種基于表面增強拉曼光譜快速檢測四種興奮劑的方法，具體包括如下步驟：

(1)特征峰的指認：確定興奮劑的特征峰位置；

(2)采集標準品SERS譜圖：對不同濃度的興奮劑標準品甲醇水溶液分別加入溶膠及團聚劑，然后進行SERS檢測，得到不同濃度的興奮劑標準品甲醇水溶液SERS譜圖；

(3)實際樣SERS譜圖采集：將待測樣、緩沖液和萃取劑混合，吸取有機相進行SERS檢測得到興奮劑實際樣的SERS譜圖。

在本發明一較佳實施例中，所述興奮劑為克倫特羅、美沙酮、羥考酮和氯氮卓中的至少一種。

在本發明一較佳實施例中，所述步驟(2)中增強基底為粒徑30～60nm的金納米溶膠或粒徑80～100nm的銀納米溶膠中的一種。

在本發明一較佳實施例中，所述步驟(2)中的團聚劑為無機酸、無機堿、無機鹽中的一種或幾種，優選為NaOH、HCl、NaCl中的一種或幾種，團聚劑的濃度為1.5-2.5M。