[發明專利]一種大規模高產量細胞連續培養和收獲的生產工藝

在審

• 申請號: 202310019919.4
• 申請日: 2023-01-06
• 公開（公告）號: CN116064409A
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 夏穎;闕紅;喻超;李華順
• 申請（專利權）人: 四川阿思科力生物科技有限公司;蘇州因特藥物研發有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10
• 代理公司: 北京布瑞知識產權代理有限公司 11505
• 代理人: 秦衛中

1.一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，包括以下步驟：經細胞復蘇和種子擴增后，達到用于生產的細胞數量，然后置于生物反應器中進行連續循環生產的第一個循環；第一個循環結束后，從生物反應器中收獲部分細胞用于成品制備，再向該反應器中補足新鮮培養基繼續進行培養，實現在同一生物反應器中的連續接種、培養以及收獲的大規模高產量連續培養生產工藝。

2.根據權利要求1所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，所述種子擴增為多級傳代種子擴增，種子擴增培養方式為懸浮培養。

3.根據權利要求2所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，所述種子擴增培養的容器為搖瓶或搖瓶和反應器的組合。

4.根據權利要求3所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，所述細胞復蘇的培養過程如下所示：從液氮罐中取出凍存的細胞，待細胞復融后進行培養，使細胞活率恢復到80％以上，細胞密度高于5×10⁵cells/mL。

5.根據權利要求4所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，所述種子擴增的培養過程如下所示：將復蘇培養的細胞至不同體積的容器中進行傳代擴增，每次傳代體積擴大2-10倍。

6.根據權利要求5所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，當所述種子擴增培養的容器為搖瓶時，所述懸浮培養使用的搖床參數為37℃，5％CO₂，30～100rpm。

7.根據權利要求5所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，當所述種子擴增培養的容器包含反應器時，所述反應器為一個或多個不同體積的WAVE反應器。

8.根據權利要求1所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，所述生物反應器為WAVE反應器；優選地，所述WAVE反應器為50L的WAVE反應器。

9.根據權利要求1所述的一種大規模高產量細胞連續培養生產工藝，其特征在于，所述細胞包括治療用免疫細胞或經工程化改造的免疫細胞，所述免疫細胞包括B細胞、T細胞、NK細胞、單核細胞、巨噬細胞、嗜中性粒細胞、粒細胞、先天淋巴樣細胞或樹突細胞。

10.一種大規模高產量細胞連續收獲工藝，其特征在于，在權利要求1-10任一項所述的生產工藝的連續循環生產環節，對每個循環的細胞產物進行部分收獲，剩余的細胞作為下一輪培養的種子，實現在同一生物反應器中細胞的連續循環培養和分段收獲。