[發明專利]一種肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品及其制備方法

在審

• 申請號: 202310017280.6
• 申請日: 2023-01-06
• 公開（公告）號: CN116106560A
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 鄒繼華;黃愷;賈江花;李富勇
• 申請（專利權）人: 美康生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/96
• 分類號: G01N33/96;G01N33/68;G01N1/28;G01N1/38;G01N1/42
• 代理公司: 寧波甬致專利代理有限公司 33228
• 代理人: 胡天人

1.一種肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品，其特征在于，所述肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品由基質液和抗原標志物組成，所述基質液包括人血清基質和基質緩沖液，所述抗原標志物包括層粘連蛋白、殼多糖3樣蛋白1、IV型膠原、透明質酸、III型前膠原N端肽、甘膽酸、纖維結合蛋白中的一種或多種。

2.如權利要求1所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品，其特征在于，所述人血清基質包括正常人混合血清、去激素血清、去脂類血清中的一種或多種，所述人血清基質中乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒和艾滋病標志物抗體的檢測結果均為陰性。

3.如權利要求1所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品，其特征在于，所述基質緩沖液包括緩沖劑、蛋白保護劑、凍干保護劑、防腐劑，所述緩沖劑為磷酸鹽緩沖劑、HEPES、Tris-HCl中的一種或多種。

4.如權利要求3所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品，其特征在于，所述蛋白保護劑為PEG、BSA、魚皮明膠、氯化鈉的一種或多種。

5.如權利要求3所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品，其特征在于，所述凍干保護劑為蔗糖、海藻糖、甘露醇的一種或多種。

6.如權利要求3所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品，其特征在于，所述防腐劑為Proclin?300、疊氮鈉、左氧氟沙星、慶大霉素的一種或多種。

7.一種權利要求1～6任一所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：在10～100mmol/L基質緩沖液中加入3％～15％的蛋白保護劑、3％～15％凍干保護劑、0.5％～1.5％防腐劑，充分混合均勻制得基質緩沖液；

S2：將人血清基質恢復至室溫條件，按照血清基質：基質緩沖液＝7:3的比例充分混合，調整pH至7.0～7.4，并使用過濾器過濾，去除雜質獲得質控品的基質；

S3：向步驟S2中獲得的質控品基質中加入肝纖維化及肝炎標志物抗原標志物，所述肝纖維化及肝炎標志物抗原包括透明質酸、殼多糖3樣蛋白1、層粘連蛋白、III型前膠原N端肽、IV型膠原、甘膽酸和纖維結合蛋白中的一種或多種；

S4：將充分混勻的質控品混合液分裝，使用真空冷凍干燥的方法進行凍干。

8.如權利要求7所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品的制備方法，其特征在于，所述抗原標志物在所述肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品中的濃度為：透明質酸為11-15ng/mL、殼多糖3樣蛋白1為72-48ng/mL、IV型膠原為55-75ng/mL、III型前膠原N端肽為11-15ng/mL、層粘連蛋白為64-96ng/mL、甘膽酸為2.5-3.5mg/L、纖維結合蛋白為80-120mg/L。

9.如權利要求7所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品的制備方法，其特征在于，所述抗原標志物在所述肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品中的濃度為：透明質酸為270-330ng/mL、殼多糖3樣蛋白1為240-320ng/mL、IV型膠原為200-260ng/mL、III型前膠原N端肽為18-24ng/mL、層粘連蛋白為180-240ng/mL、甘膽酸為8-12mg/L、纖維結合蛋白為180-240mg/L。

10.如權利要求7～9任一所述的肝纖維化及肝炎標志物的多項質控品的制備方法，其特征在于，在步驟S4凍干分裝前使用化學發光免疫分析儀和生化分析儀進行檢測，滿足質控品濃度要求時，進行冷凍干燥的步驟，凍干的質控品密封后于2-8℃穩定保存。