[發(fā)明專利]膠體金免疫層析試紙的制備方法、膠體金免疫層析試紙及試紙盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310014913.8
• 申請日: 2023-01-03
• 公開（公告）號: CN116047051A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳曉明;劉念
• 申請（專利權(quán)）人: 南方工業(yè)技術(shù)研究院（深圳）
• 主分類號: G01N33/532
• 分類號: G01N33/532;G01N33/543;G01N33/569
• 代理公司: 深圳市世紀恒程知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 44287
• 代理人: 羅秋蓮

本發(fā)明涉及免疫檢測分析技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種膠體金免疫層析試紙的制備方法、膠體金免疫層析試紙及試紙盒。膠體金免疫層析試紙的制備方法，包括以下步驟：將流感病毒A抗體與粒徑為50nm?70nm的膠體金顆粒結(jié)合形成免疫標簽，將免疫標簽固定于結(jié)合墊，備用；在層析膜上設(shè)置檢測線和質(zhì)控線，將用以識別流感病毒A抗原的第一抗體固定在檢測線，將用以識別流感病毒A抗體的第二抗體固定在質(zhì)控線，備用；將樣本墊、固定有免疫標簽的結(jié)合墊、固定有第一抗體和第二抗體的層析膜以及吸水墊依次設(shè)置在底板上，形成檢測流感病毒A抗原的膠體金免疫層析試紙。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫檢測分析技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種膠體金免疫層析試紙的制備方法、膠體金免疫層析試紙及試紙盒。

背景技術(shù)

膠體金免疫層析技術(shù)是一種將抗原抗體免疫反應(yīng)與膠體金標記示蹤技術(shù)結(jié)合用于抗原、抗體含量定性定量檢測的技術(shù)。抗體的膠體金標記主要是通過膠體金與蛋白質(zhì)之間的靜電作用力進行牢固結(jié)合的，由于其快速、簡便、成本低、穩(wěn)定性好等優(yōu)點，特別是為現(xiàn)場快速檢測叩開了一扇嶄新的大門。

流行性感冒病毒簡稱流感病毒。它分為甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，流感病毒可引起人、禽、豬、馬、蝙蝠等多種動物感染和發(fā)病，是人流感、禽流感、豬流感、馬流感等人與動物疫病的病原。其中人類流感病毒根據(jù)其核蛋白的抗原性可以分為三類:甲型流感病毒(Influenza?Avirus)，又稱A型流感病毒；乙型流感病毒(Influenza?B?virus)，又稱B型流感病毒；丙型流感病毒(Influenza?C?virus)，又稱C型流感病毒，甲型流感病毒(InfluenzaA?virus)為常見流感病毒，甲型流感病毒最容易發(fā)生變異。

現(xiàn)有技術(shù)中，有采用膠體金免疫層析技術(shù)檢測流感病毒A，在制備免疫標簽的過程中，需要使用納米金溶液與抗體進行反應(yīng)，以在納米金表面標記上抗體，在標記過程中會出現(xiàn)標記效率低的問題，如何提高標記效率是需要解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的主要目的是提供一種膠體金免疫層析試紙的制備方法，旨在提高標記效率。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提出的一種膠體金免疫層析試紙的制備方法，包括以下步驟：

將流感病毒A抗體與粒徑為50nm-70nm的膠體金顆粒結(jié)合形成免疫標簽，將所述免疫標簽固定于結(jié)合墊，備用；

在層析膜上設(shè)置檢測線和質(zhì)控線，將用以識別流感病毒A抗原的第一抗體固定在所述檢測線，將用以識別所述流感病毒A抗體的第二抗體固定在所述質(zhì)控線，備用；

將樣本墊、固定有所述免疫標簽的結(jié)合墊、固定有所述第一抗體和所述第二抗體的層析膜以及吸水墊依次設(shè)置在底板上，形成檢測流感病毒A抗原的膠體金免疫層析試紙。

可選地，在將流感病毒A抗體與粒徑為50nm-70nm的膠體金顆粒結(jié)合形成免疫標簽，將所述免疫標簽固定于結(jié)合墊，備用的步驟中，包括以下步驟：

準備質(zhì)量體積濃度為萬分之四、粒徑為50nm-70nm的膠體金顆粒構(gòu)成的膠體金溶液，并調(diào)節(jié)所述膠體金溶液的pH，然后加入濃度為10ug/mL-30ug/mL流感病毒A抗體，反應(yīng)預(yù)設(shè)時間，再加入封閉劑，封閉預(yù)設(shè)時間，得到反應(yīng)后的溶液并濃縮，得到免疫標簽，采用復(fù)溶液將所述免疫標簽重懸，得到免疫標簽復(fù)溶液，將所述免疫標簽復(fù)溶液涂覆于結(jié)合墊，烘干，備用。

可選地，在將流感病毒A抗體與粒徑為50nm-70nm的膠體金顆粒結(jié)合形成免疫標簽，將所述免疫標簽固定于結(jié)合墊，備用的步驟中，包括以下步驟：