[發(fā)明專利]一種Cathepsin L抑制組合物在細胞擴增中的用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202310012508.2
• 申請日: 2023-01-05
• 公開（公告）號: CN115806623A
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王野;葉慕華
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州達魏科技有限公司
• 主分類號: C07K16/40
• 分類號: C07K16/40;A61K39/395;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京久誠知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11542
• 代理人: 齊葵

本發(fā)明涉及一種CathepsinL抑制組合物在細胞擴增中的用途。本發(fā)明制備獲得了重組CathepsinL蛋白，將所述蛋白免疫小鼠制備獲得了相應(yīng)的單克隆抗體，所述抗體具有較好的結(jié)合和抑制蛋白活性的能力同時能夠抑制肝癌的活力，在制藥領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請涉及生物領(lǐng)域，更具體的涉及一種Cathepsin L抑制組合物在細胞擴增中的用途。

背景技術(shù)

組織蛋白酶(cathepsin)在1920年由Lanner首次發(fā)現(xiàn)，它廣泛存在于動物各種組織細胞內(nèi)，在維持動物正常生命活動中扮演著重要角色。根據(jù)酶的催化機制，組織蛋白酶分為以下4大類:金屬蛋白酶、絲氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶。除此之外，還有谷氨酸蛋白酶、蘇氨酸蛋白酶和一些尚未進行分類的蛋白酶。根據(jù)組織蛋白酶代表底物還可以分為L、B1、D、E、F、FG、GF、G、H、S等幾大類。

Cathepsin L是半胱氨酸蛋白酶家族的重要成員之一，廣泛分布于人體各種組織細胞的溶酶體中。CathepsinL的蛋白分子量為30KD，當溶酶體膜不穩(wěn)定時可釋放至胞漿，被溶酶體中其他的蛋白水解酶激活或自身激活，形成24KD的活性形式。Cathepsin L主要功能是降解各種組織蛋白，水解某些前體蛋白(酶原和激素原)，生成其活性形式，或激活其他蛋白水解酶系統(tǒng)，從而參與機體的多種生理活動，如抗原遞呈、激素前體的活化、骨基質(zhì)的降解等。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，Cathepsin L主要由激活的小膠質(zhì)細胞產(chǎn)生和釋放。

溶酶體CTSL是多種腫瘤疾病中的標志物和潛在治療靶標的蛋白水解酶。根據(jù)研究表明，癌細胞通過分泌蛋白酶降解細胞外膜成分，從而促進腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。對3種鼠黑素瘤變體的觀察發(fā)現(xiàn)，癌細胞通過CTSL mRNA的持久翻譯來維持CTSL的高表達水平，而腫瘤細胞本身就是CTSL mRNA表達升高的來源。測定腫瘤相鄰的非惡性組織和遠離腫瘤的非惡性組織的勻漿中幾種蛋白酶樣肽酶的活性，發(fā)現(xiàn)腫瘤相鄰的A-NM中CTSL的活性顯著高于D-NM組織。與正常組織相比，在胃癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌和甲狀腺癌中，也有CTSL酶活性增加的報道，這提示CTSL表達上調(diào)與疾病進展有密切關(guān)系。同時研究發(fā)現(xiàn)CTSL參與卵巢癌細胞的增殖和侵襲，CTSL在卵巢癌(ovariancancer，OC)中過度表達，CTSL的下調(diào)則能顯著抑制了人卵巢癌細胞(skov3)的增殖和侵襲能力，而CTSL在ov90細胞中的上調(diào)則會產(chǎn)生相反的效果。與OC細胞相比，在裸鼠體內(nèi)CTSL沉默細胞發(fā)育成腫瘤的能力降低，而這些細胞的異種移植瘤生長明顯受到抑制。大量文獻資料表明癌癥組織CTSL的表達水平顯著高于正常組織，其中腎和睪丸腫瘤表達的CTSL水平最高，多數(shù)乳腺癌表達的CTSL水平較高。CTSL的過表達與人類動脈粥硬化和主動脈瘤(aorticaneurysm，AA)的發(fā)生發(fā)展同樣有著密切聯(lián)系。重組半胱氨酸蛋白酶抑制劑C具有較高的抗蛋白酶活性，主要通過抑制CTSL活性，達到抑制癌細胞的生長和侵襲的效果。在主動脈瘤中，當不存在半胱氨酸蛋白酶抑制劑C時，CTSL的活性增強，促進了微血管形成、細胞凋亡、白細胞黏附及細胞增殖，從而導(dǎo)致AA病變面積的增大以及動脈管腔直徑增大。因此CTSL和半胱氨酸蛋白酶抑制劑C可能與AA存在相關(guān)關(guān)系。以CTSL結(jié)構(gòu)特點為治療腫瘤的突破點，中國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)阿斯非芬酯及其類似物能與CTSL形成氫鍵，與其緊密結(jié)合，從而抑制癌細胞的增殖和遷徙。總之，通過敲除卵巢癌細胞和乳腺癌細胞的CTSL基因來減少腫瘤細胞的增殖、遷移和侵襲，增強膠質(zhì)瘤細胞對放射治療敏感性。

目前，針對Cathepsin L抑制劑主要包括Clik148、Z-FY-DMK等幾種類型，但是針對Cathepsin L生物類的抑制劑特別是Cathepsin L單克隆抗體的研究還不夠多。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種特異性的Cathepsin L蛋白單克隆抗體。

所述單克隆抗體是通過免疫小鼠制備獲得的。

具體的，所述單克隆抗體亞型是IgG1類型的。