[發(fā)明專利]提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202310005266.4
• 申請(qǐng)日: 2023-01-04
• 公開（公告）號(hào): CN116034943A
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梁雅妍;黃燕華;周爍;彭杰;張續(xù)勐;王瑋;高紅艷;邱志勇;何豐強(qiáng);王德輝;卓福球
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院;英德德輝農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): A01K67/02
• 分類號(hào): A01K67/02
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11369
• 代理人: 李開成

1.提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，包括：

1)選擇胸圓如球、尾短而上翹、闊胸平頭、羽毛緊密且毛色均一、體重≥800g、頸部短而粗壯、產(chǎn)蛋率高、受精率高的種鴿作為基礎(chǔ)育種群，利用基礎(chǔ)育種群進(jìn)行連續(xù)繁育，獲得F1代；

2)F1代配對(duì)，孵育的乳鴿25日齡時(shí)，淘汰體重低于平均體重10％的個(gè)體，留種的乳鴿個(gè)體佩戴個(gè)體標(biāo)識(shí)環(huán)，轉(zhuǎn)入青年鴿舍作為后備種鴿飼養(yǎng)，獲得F2代；

3)第一輪篩選時(shí)，F(xiàn)2代種鴿產(chǎn)蛋后將鴿蛋取出進(jìn)行人工孵化，并使種鴿孵化引蛋，就巢第15天，取靜脈血，然后使引蛋內(nèi)部發(fā)出滾動(dòng)聲，第16天使引蛋內(nèi)部發(fā)出滾動(dòng)聲和啄殼聲音，第17天取種鴿靜脈血，檢測(cè)第15、第17天靜脈血中催乳素的含量，并計(jì)算靜脈血中第17天催乳素含量相對(duì)第15天催乳素含量的相對(duì)增長(zhǎng)量；提取第15天靜脈血的總DNA，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)，計(jì)算出F2代催乳素基因的平均相對(duì)拷貝數(shù)，淘汰催乳素含量相對(duì)增長(zhǎng)量低于平均相對(duì)增長(zhǎng)量5％的種鴿以及第17天鴿乳產(chǎn)生質(zhì)量差的種鴿，未淘汰種鴿對(duì)應(yīng)的鴿蛋人工孵化后由保姆鴿哺育長(zhǎng)大，并作為種鴿以作為下一輪篩選，第二輪篩選時(shí)，重復(fù)第一輪篩選時(shí)的篩選步驟，經(jīng)過(guò)N輪的篩選以使催乳素的表達(dá)相對(duì)穩(wěn)定；在末輪篩選時(shí)，檢測(cè)并計(jì)算出靜脈血中催乳素基因的相對(duì)拷貝數(shù)，選擇末輪篩選時(shí)催乳素基因相對(duì)拷貝數(shù)高于第一輪篩選時(shí)的平均相對(duì)拷貝數(shù)3％以上的種鴿作為F3代；

4)F3代在進(jìn)行下輪選育時(shí)，引蛋內(nèi)部發(fā)出滾動(dòng)聲時(shí)間提前一天，采血時(shí)間相應(yīng)提前一天，重復(fù)步驟3)以篩選出F4代，如此重復(fù)以篩選出能夠提前分泌鴿乳的種鴿。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，實(shí)時(shí)熒光定量PCR的目標(biāo)基因引物對(duì)P1為：

上游引物F1：tcctggaacgatcccctgat；

下游引物R1：tctgcagctggctgagaagatt；

參照基因引物對(duì)P2為：

上游引物F2：tccttcgtctggatctggctgg；

下游引物R2：ctctctcggctgtggtggtgaa。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，實(shí)時(shí)熒光定量PCR的反應(yīng)體系為：2uL?10ng/uL的DNA模板，10uL?2×熒光定量PCR緩沖液，上游引物和下游引物各0.5uL，7μL?ddH₂O。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，實(shí)時(shí)熒光定量PCR的反應(yīng)程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性5min；95℃變性30s，60℃退火35s，72℃延伸40s，40個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min；20℃保存。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，所述引蛋包括：

殼體件，其為橢圓體狀結(jié)構(gòu)，所述殼體件由硬質(zhì)材料制成；

滾動(dòng)體，其設(shè)置在所述殼體件的內(nèi)部，所述滾動(dòng)體的橫截面為圓形，所述滾動(dòng)體與所述殼體件的內(nèi)壁抵接；

驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)，其通過(guò)連接件固定在所述殼體件的內(nèi)部，所述驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)用于驅(qū)動(dòng)所述滾動(dòng)體轉(zhuǎn)動(dòng)；

控制器，其與所述驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)連接以控制驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)的啟停，所述控制器通過(guò)無(wú)線傳輸裝置與外界控制系統(tǒng)信號(hào)連接；

蓄電池，其與所述驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)、控制器、無(wú)線傳輸裝置電性連接以為驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)、控制器、無(wú)線傳輸裝置提供電源。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，所述殼體件的內(nèi)壁設(shè)置有彈性塑料膜，所述滾動(dòng)體的弧形面抵接在所述彈性塑料膜上。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，所述驅(qū)動(dòng)結(jié)構(gòu)為步進(jìn)電機(jī)，所述步進(jìn)電機(jī)的輸出軸與所述滾動(dòng)體連接以驅(qū)動(dòng)所述滾動(dòng)體在殼體件中轉(zhuǎn)動(dòng)。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的提早分泌鴿乳的種鴿分子輔助選育方法，其特征在于，所述步進(jìn)電機(jī)的輸出軸上設(shè)置有第一單向轉(zhuǎn)動(dòng)軸承，所述滾動(dòng)體與所述第一單向轉(zhuǎn)動(dòng)軸承固定連接。