[發明專利]一種硝基苯高效降解菌劑、制備及其應用

在審

• 申請號: 202211725447.6
• 申請日: 2022-12-30
• 公開（公告）號: CN116333916A
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 趙振華;邵汝英;高峰;夏嬌
• 申請（專利權）人: 江蘇藍必盛化工環保股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/38
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 王慧穎

1.一種賴氨酸芽孢桿菌(Lysinibacillus?sp.LBQ22-1)，其特征在于，其保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號：CGMCC?NO.26095，保藏日期為2022年11月10日。

2.一種硝基苯高效降解菌劑的制備方法，其特征在于，所述的方法為：所述的硝基苯高效降解菌劑中含有賴氨酸芽孢桿菌(Lysinibacillus?sp.LBQ22-1)，所述的制備方法為：

步驟一、固體平板培養：將賴氨酸芽孢桿菌(Lysinibacillus?sp.LBQ22-1)轉接到固體培養基上，于25～35℃培養箱中培養36h，使菌株活化；

步驟二、種子液培養：將經步驟一活化的菌株接種于液體培養基中，25～35℃、150～200rpm振蕩培養24～36h，至菌株處于對數生長期；

步驟三、菌種發酵擴大培養：將步驟二所述的培養液按照10％比例接種于發酵培養基中進行發酵培養；獲得濃度為1×10⁹～1×10¹¹CFU/mL發酵產物；

步驟四、在步驟四獲得的發酵產物中加入20％保護劑后制備成干粉狀菌劑即可。

3.根據權利要求1所述的硝基苯高效降解菌劑的制備方法，其特征在于，所述的步驟一中的固體培養基的配置如下：牛肉膏3.0g/L；蛋白胨10.0g/L；

NaCl5.0g/L；去離子水溶解，pH7～8，115～121℃滅菌15～30min。

4.根據權利要求1所述的硝基苯高效降解菌劑的制備方法，其特征在于，所述的步驟二液體培養基的配制方法如下：酵母膏1～10g/L，蛋白胨5～10g/L，葡萄糖5～10g/L，NH₄Cl1～10g/L，K₂HPO₄1～10g/L，去離子水溶解，pH＝7.0～8.0，115～121℃滅菌15～30min。

5.根據權利要求1所述的硝基苯高效降解菌劑的制備方法，其特征在于，所述的步驟三菌種發酵擴大培養基如下：酵母膏1～5g/L，蛋白胨5～10g/L，葡萄糖5～10g/L，NH₄Cl1～5g/L，K₂HPO₄1～5g/L，KH₂PO₄1～5g/L，微量元素溶液1～5mL，消泡劑0.2％，蒸餾水溶解，pH＝7.0～8.0，115～121℃滅菌15～30min；所述的微量元素液的配方為：MgSO₄0.5g/L；MnSO₄0.1g/L；

H₃BO₃0.1g/L；ZnSO₄·7H₂O0.1g/L；FeSO₄·7H₂O0.3g/L；pH＝7；

所述的步驟三中的發酵培養條件為：罐溫為37℃，罐壓為0.01～0.1MPa，通氣量為1:0.6～1.2，攪拌速度150rpm、發酵時間48～72h。

6.根據權利要求1所述的硝基苯高效降解菌劑的制備方法，其特征在于，所述的步驟五中的保護劑配方為：酵母粉35％；魚蛋白胨35％；微量元素30％；

所述的微量元素液的配方為：MgSO₄0.5g/L；MnSO₄0.1g/L；H₃BO₃0.1g/L；

ZnSO₄·7H₂O0.1g/L；FeSO₄·7H₂O0.3g/L；pH＝7。

7.一種如權利要求1～6任一所述的制備方法制得的硝基苯高效降解菌劑。

8.根據權利要求7所述的硝基苯高效降解菌劑，其特征在于，所述的活性微生物中微生物制劑有效活菌數量≥10¹⁰CFU/g。