[發明專利]新型抗除草劑乙酰輔酶A羧化酶突變體及其應用

在審

• 申請號: 202211707567.3
• 申請日: 2021-12-24
• 公開（公告）號: CN116064428A
• 公開（公告）日: 2023-05-05
• 發明（設計）人: 請求不公布姓名
• 申請（專利權）人: 山東舜豐生物科技有限公司
• 主分類號: C12N9/00
• 分類號: C12N9/00;C12N15/82;A01H5/10;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 北京君慧知識產權代理事務所(普通合伙) 11716
• 代理人: 劉曉佳

1.一種突變型的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)，所述突變型的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)與親本乙酰輔酶A羧化酶(ACC)的氨基酸序列相比，在對應于SEQ?ID?No.1所示氨基酸序列的以下任一或任意幾個氨基酸位點處存在突變：第2273位、第2168位、第1975位、第1954位、第1864位、第2211位、第2139位；

所述第2273位氨基酸突變為F，所述第2168位氨基酸突變為P，所述第1975位氨基酸突變為F，所述第1954位氨基酸突變為S，所述第1864位氨基酸突變為V，所述第2211位氨基酸突變為K，所述第2139位氨基酸突變為V。

2.一種突變型的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)，所述突變型的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)選自以下I-III任意一組：

I、由SEQ?ID?No.1所示氨基酸序列在包含以下任一或任意幾個氨基酸位點處產生突變得到的突變型的ACC：第2273位、第2168位、第1975位、第1954位、第1864位、第2211位、第2139位；

II、與I所述的突變型的ACC相比，具有I中所述的突變位點；并且，與I所述的突變型的ACC相比，具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的序列同一性的突變型的ACC，并且保留了除草劑抗性的活性；

III、與I所述的突變型的ACC相比，具有I中所述的突變位點；并且，與I所述的突變型的ACC相比，具有一個或多個氨基酸的置換、缺失或添加的序列，并且保留了除草劑抗性的活性；所述一個或多個氨基酸包括1個，2個，3個，4個，5個，6個，7個，8個，9個或10個氨基酸的置換、缺失或添加。

3.根據權利要求1-2任一所述的突變型的ACC，其特征在于，所述親本ACC來源于單子葉植物或雙子葉植物。

4.一種多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸編碼權利要求1-3任一所述的突變型的ACC。

5.一種核酸構建體，其特征在于，所述核酸構建體含有權利要求4所述的多核苷酸，優選的，還含有與之可操作連接的調控元件；

優選地，所述調控元件選自下組中的一種或任意幾種：增強子、轉座子、啟動子、終止子、前導序列、多核苷酸序列、標記基因。

6.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞包括權利要求1-3任一所述的突變型的ACC，或權利要求4所述的多核苷酸，或權利要求5所述的核酸構建體。

7.一種賦予植物對除草劑產生抗性的方法或者制備具有除草劑抗性的植物的方法，所述方法包括在植物細胞、植物種子、植物組織、植物部分或植物中引入權利要求1-3任一所述突變型的ACC的步驟。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述除草劑為ACCase抑制劑類除草劑。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述除草劑選自高效氟吡甲禾靈、烯禾啶、吡氟氯禾靈中的一種或任意幾種組合。

10.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法包括將權利要求1-3任一所述的突變型的ACC在植物細胞、植物種子、植物組織、植物部分或植物中進行表達的步驟。

11.根據權利要求10所述的方法，其特征在于，所述方法包括將植物的內源性ACC進行突變從而引入所述突變型的ACC的步驟。

12.權利要求1-3任一所述的突變型的ACC、權利要求4所述的多核苷酸、權利要求5所述的核酸構建體、或權利要求6所述的宿主細胞在制備具有除草劑抗性的植物中的用途。

13.根據權利要求12所述的用途，其特征在于，所述除草劑為ACCase抑制劑類除草劑。