[發明專利]一種利用滲透性全細胞生產單一聚合度麥芽糊精的方法

在審

• 申請號: 202211674900.5
• 申請日: 2022-12-26
• 公開（公告）號: CN115948317A
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發明（設計）人: 江波;鄭露華;常書強;張濤;穆國偉;周瑞琦
• 申請（專利權）人: 江南大學;山東香馳健源生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/56;C12N15/61;C12N9/24;C12N9/90;C12P19/14;C12P19/04;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 王志新

1.一種重組的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是表達編碼環麥芽糊精酶的基因cdase或同時表達編碼環麥芽糊精酶的基因cdase和編碼麥芽寡糖基海藻糖合成酶的基因mtsase，出發菌株為滲透性全細胞；所述滲透性全細胞是敲除大腸桿菌的SEQ?ID?NO:1所示基因，獲得的大腸桿菌底盤細胞。

2.根據權利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述出發菌為E.coliBL21(DE3)。

3.根據權利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述環麥芽糊精酶的基因cdase的基因序列如SEQ?ID?NO:4所示；所述麥芽寡糖基海藻糖合成酶的基因mtsase的基因序列如SEQ?ID?NO:5所示。

4.一種用于生產麥芽糊精的全細胞的制備方法，其特征在于，在滲透性全細胞中表達編碼環麥芽糊精酶的基因cdase或同時表達編碼環麥芽糊精酶的基因cdase和編碼麥芽寡糖基海藻糖合成酶的基因mtsase，經發酵后獲得的全細胞。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，表達編碼環麥芽糊精酶的基因cdase發酵獲得的全細胞是含有環麥芽糊精酶的全細胞；同時表達編碼環麥芽糊精酶的基因cdase和編碼麥芽寡糖基海藻糖合成酶的基因mtsase發酵獲得的全細胞是含有環麥芽糊精酶和麥芽寡糖基海藻糖合成酶的全細胞；所述環麥芽糊精酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示；麥芽寡糖基海藻糖合成酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:3所示。

6.一種生產麥芽糊精的方法，其特征在于，所述方法為將環糊精加入到權利要求1-3任一項所述的重組基因工程菌發酵液中進行發酵10～20小時。

或者，所述方法為將權利要求4或5所述的制備方法獲得的全細胞加入到含有環糊精的反應液中反應3～6小時。

7.根據權利要求6所述的生產麥芽糊精的方法，其特征在于，權利要求1所述的重組基因工程菌在環糊精溶液中的添加量為0.1～10U/g_環糊精。

8.根據權利要求6所述的生產麥芽糊精的方法，其特征在于，環糊精的添加濃度為10g/L～200g/L；所述環糊精為α-環糊精、β-環糊精和/或γ-環糊精；所述反應的溫度為25～65℃、pH為5.0～8.5。

9.權利要求3所述的基因工程菌或權利要求4或5所述的制備方法在生產單一聚合度麥芽糊精或單一聚合度非還原性麥芽糊精中的應用。

10.根據權利要求6-8任一項所述的方法在制備麥芽糊精、含有麥芽糊精的食品、含有麥芽糊精的藥品或含有麥芽糊精的日化產品中的應用。